发明名称 含于 –螺旋一区域变异之生长激素及与其他突变体之混合
摘要 本发明系关于只有改变α螺旋结构1区域中胺基酸的生长激素类似物,或是在α螺旋结面3区域及/或α螺旋结构2区域,以及与生长激素原始的胺基酸序列改变的组合性突变之生长激素类似物。所得到的类似物配成持续性释放的配方时相当稳定,而且仍具有生物活性。除此之外,本发明亦提供用定点式的突变产生蛋白质及/或多胜的方法。
申请公布号 TW198040 申请公布日期 1993.01.11
申请号 TW081101242 申请日期 1992.02.20
申请人 氰胺公司;通用生物工业公司 发明人 狄伯瑞.塔帝.沙利夫;梅尔.费雪;迈克.理查.利班
分类号 C07K7/26;C12N15/18 主分类号 C07K7/26
代理机构 代理人 陈长文 台北巿敦化北路二○一号七楼
主权项 1.一种猪,牛,人或羊生长激素,其包括有:该生长激 素 在-螺旋结构1区域中具有突变或A6T或A14D,或具有 变 重突变S11RA14D或Q21HH22R或A6TS11R或P8TS11R,藉此使 得该生长激素比该生长激素的原始型式更具可溶 性,同时 维持其在持续性释放配方中之生物活性。2.一种 猪,牛,人或羊生长激素,其包括有:该生长激素 在-螺旋结构3区域中具有突变I122L或L115E或L115K 或 L118E或L118T或L118K或I122E或M126A或L118A或G121A或 K114R或K116R或具有双重突变L115KL118E或L118EI122K或 E119LQ123L或I122LM126A或I122LL118A,该生长激素在 -螺旋结构1区域中在A6或A14具一个突变或在S11/A14 或 O21/H22或A6/S11或P8/S11具有双重突变,藉此使得该生 长激素比该生长激素的原始型式更具可溶性,维持 其在持 续性释放配方中之生物活性。3.根据申请专利范 围第2项之生长激素,其中该-螺旋结 构1区域突变包含有A6T,A14D,S11RA14D,Q21HH22R, A6TS11R或P8TS11R。4.根据申请专利范围第3项之生长 激素,其中该-螺旋结 构3区域突变是为I122L。5.根据申请专利范围第4项 之生长激素,其中该-螺旋结 构1区塽双重突变是为A6TS11R。6.根据申请专利范围 第4项之生长激素,其中该双重突变 是为P8TS11R。7.根据申请专利范围第1项之生长激素 ,其中该生长激素 的四个半胱氨酸中至少有1个胺基酸被取代,修饰, 删除 或衍生。8.根据申请专利范围第7项之生长激素,其 中的四个(4)半 胱氨酸,两个在小弯道,而两个在大弯道,而且至少 有一 个(1)半胱氨酸的性置被选自下列之胺基酸个别取 代:氨 胍戊酸,离胺酸,天门冬酸,麸胺酸,天门冬素,麸胺, 组胺酸,胺基丙酸,胺基乙酸,异白胺酸,白氨酸,缬 氨 酸,苯胺基丙酸,色胺酸,酥胺酸,甲硫氨酸,丝氨酸, 苏胺酸或 咯酸。9.根据申请专利范围第8项之生长 激素,其中该胺基酸是 个别选自麸胺酸或胺基丙酸。10.根据申请专利范 围第9项之生长激素,其中位于胺基酸 第183号没第191号位置的半胱氨酸被麸胺酸取代。 11.根据申请专利载围第9项之生长激素,其中位于 胺基酸 第183号及第191号位置的半胱氨酸被胺基丙酸取代 。12.根据申请专利范围第10项之生长激素,其中该 -螺旋 结构1区域突变或双重突变是为A6T,A14D,511RA14D, Q21HH22R,A6TS11R或P8TS11R。13.根据申请专利范围第11项 之生长激素,其中该-螺旋 结构1区域突变或双重突变是为A6T,A14D,S11RA14D, Q21HH22R,A6TS11R或P8TS11R。14.根据申请专利范围第2项 之生长激素,其中该生长激素 中四个半胱氨酸至少有1个胺基酸被取代修饰,删 除或衍 生。15.根据申请专利范围第14项之生长激素,其中 的四个(4) 半胱氨酸,两个性于小弯道,而两个性于大弯道,而 且至 少有1个(1)半胱氨酸的性置被选自下列之胺基酸个 别所取 代:氨胍戊酸,离胺酸,天门冬酸,麸胺酸,天门冬素, 麸胺,组胺酸,胺基丙酸,胺基乙酸,异白胺酸,白氨 酸 ,缬氨酸,苯胺基丙酸,色胺酸,酥胺酸,甲硫氨酸,丝 氨酸,苏胺酸或 咯酸。16.根据申请专利范围第15项 之生长激素,其中该胺基酸 是个别选自麸胺酸或胺基丙酸。17.根据申请专利 范围第16项之生长激素,其中位于胺基 酸第183号及第191号位置的半胱氨酸换成了麸胺酸 。18.根据申请专利范围第17项之生长激素,其中所 指-螺 旋结构3区域突变包含有I122L,L115D,L115K, L115KL118E,L118E,L118T,L118K,L118E1122K,I122E ,E119LQ123L,M126A,L118A,G121A,K114R,K116R, I122LM126A或I122LL118A。19.根据申请专利范围第18项之 生长激素,其中该-螺旋 结构1区域突变是为A6T,A14D,S11RA14D,Q21HH22R, A6TS11R或P8TS11R。20.根据申请专利范围第19项之生长 激素,其中该-螺旋 结构3区域突变是为I122L。21.根据申请专利范围第 20项之生长激素,其中该-旋结 构1区域突变是为A6TS11R。22.根据申请专利范围第20 项之生长激素,其中所指的- 螺旋结构1区域突变是为P8TS11R。23.根据申请专利 范围第7项之生长激素,其中的四个(4) 半胱氨酸,两个位于小弯道,而两个位于大弯道,而 且至 少有1个(1)半胱氨酸被删除。24.根据申请专利范围 第7项之生长激素,其中的四个(4) 半胱氨酸已修饰成胱氨酸。25.根据申请专利范围 第24项之生长激素,其中四个(4)半 胱氨酸,两个位于小弯道,而两个位于大弯道,而且 至少 有1个(1)半胱氨酸被删除。26.根据申请专利范围第 25项之生长激素,其中该-螺旋 结构3区域突变包含有I122L,L115D,L115K,L115KL118E ,L118E,L118T,L118K,L118EI122K,I122E, E119LQ123L,M126A,L118A,G121A,K114R,K116R, I122LM126A或I122LL118A。27.根据申请专利范围第26项之 生长激素,其中该螺旋 结构1区域突变是为A6T,A14D,S11RA14D,Q21HH22R, A6T511R或P8TS11R。28.根据申请专利范围第27项之生长 激素,其中该螺旋 结构3区域突变是为I122L。29.根据申请专利范围第 28项之生长激素,其中该螺旋 结构1区域突变是为A6TS11R。30.根据申请专利范围 第28项之生长激素,其中该螺旋 结构1区域突变是为P8TS11R。31.根据申请专利范围 第14项之生长激素,其中的四个半 胱氨酸已修饰成胱氨酸。32.根据申请专利范围第 31项之生长激素,其中该螺旋 结构3区域突变包含有I122L,L115D,L115K,L115KL118E ,L118E,2118T,L118K,L118E1122K,I122E, E119LQ123L,M126A,L118A,G121A,K114R,K116R, I122LM126A或I122LL118A。33.根据申请专利范围第32项之 生长激素,其中该螺旋 结构1区域突变是为A6T,A14D,S11RA14D,Q21HH22R, A6TS11R或P8TS11R。34.根据申请专利范围第33项之生长 激素,其中该螺旋 结构3区域突变是为I122L。35.根据申请专利范围第 34项之生长激素,其中该螺旋 结构1区域突变是为A6T511R。36.根据申请专利范围 第34项之生长激素,其中该螺旋
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