水稻DNA启动子顺序的克隆方法

摘要

以既能在大肠杆菌又能在酵母菌中复制、同时又带有一个缺乏启动子的Lacz基团的穿梭质粒pCH1作为克隆水稻总DNA、叶绿体DNA的启动子顺序的载体。用牛小肠碱性磷酸酯酶处理酶切后的载体DNA，有效地防止了细菌染色体DNA的污染和载体自身的环化，提高了重组频率。本发明采用X—gal平皿筛选法，具有灵敏、分辨力高等优点。

主权项

1、一种由供体DNA及载体DNA经酶切、混合、连接、检测等过程组成的筛选启动子DNA顺序的克隆方法，其特征在于：上述的供体DNA采用水稻总DNA，上述的载体DNA为带有lacZ结构基因的PCH1质粒DNA，其中载体DNA用牛小肠碱性磷酸酯酶处理，DNA供体与载体DNA的混合比为2∶1～5∶1，上述的检测采用含有X-gal的平皿筛选法。