| 主权项 |
一种红叶石楠组织培养的方法，其特征在于所述的方法包括以下步骤：1)外植体的选取：取当年生直径2‑5mm的红叶石楠幼嫩茎尖或至少带一个单芽的茎段为外植体，剪去叶片后将茎尖或至少带一个单芽的茎段剪成2‑3cm长以备用；2)外植体消毒：将上述茎段放入盛有自来水的20KHz超声波清洗机中保持温度30‑35℃处理30‑45min，然后以自来水冲洗10‑20min；随后在超净工作台上用75％的酒精消毒25‑45秒，0.1％升汞溶液中进行两次处理，第一次处理4‑5分钟后取出，第二次处理3‑4分钟，然后以无菌水冲洗4‑5遍，置于无菌培养皿备用；3)初始诱导培养：将灭菌后的外植体各剪去2‑3mm，外植体基部向下插入初始诱导培养基中培养，培养条件为光强1800‑2500Lx、光周期10‑14h/d,温度25℃±2℃；培养6‑8d后将其中未污染的外植体转接到新的初始诱导培养基中，并继续培养12‑18d至新芽长出；所述的初始诱导培养基组成为:MS+6‑BA0.8‑1.2mg/L+NAA0.1‑0.3mg/L；4)增殖培养：将步骤3)培养出的新芽剪下并转接到新芽伸长和增殖培养基中，培养条件为光强2000‑3000Lx、光周期12h/d,温度25℃±2℃；培养20d后，至新芽长出并伸长到1cm以上；所述的新芽伸长和增殖培养基组成为：MS+6‑BA1.2‑2.2mg/L+NAA0.1‑0.3mg/L+IBA0.8‑1.2mg/L+KT0.8‑1.2mg/L；5)生根培养：将步骤4)的培养出的新芽剪下，转接到生根培养基中，培养条件为光强2000‑3000Lx、光周期12h/d,温度25℃±2℃；培养15d后，生出新根；生根培养基的配方为:1/2MS+NAA0.1‑0.3mg/L+IBA0.2‑0.5mg/L+PVP5‑10mg/L；6)炼苗和移栽：将有生根的红叶石楠幼苗的培养基瓶盖打开，室温下炼苗3‑5d后，取出幼苗，洗去根部培养基，移栽至装有河沙基质的苗床上，保持温度20‑25℃，湿度70％‑80％，适当遮荫即可；所述的6‑BA为6‑苄氨基嘌呤；所述的NAA为α‑萘乙酸；所述的IBA为吲哚‑3‑丁酸；所述的KT为激动素；所述的PVP为聚乙烯吡咯烷酮。 |
