一种层层自组装的microRNA纳米载体的制备方法及其应用

摘要

一种层层自组装的microRNA纳米载体的制备方法及其应用属于纳米材料生物学领域。本发明涉及一种基于静电吸引力的层层自组装技术，是以纳米金刚石作为基底材料，以生物安全性良好的鱼精蛋白硫酸盐和具有肿瘤靶向功能的小分子叶酸为自组装材料，构建出具有叶酸受体靶向功能的microRNA纳米载体。本发明制备的microRNA纳米载体具有自组装形成，microRNA保护能力较强，细胞靶向能力较强，基因沉默效率较高等特点。

主权项

一种层层自组装的microRNA纳米载体的制备方法，其特征在于，将纳米金刚石经过表面氧化处理，得到纳米金刚石溶液；纳米金刚石溶液和鱼精蛋白硫酸盐溶液混合得到混合溶液；将得到的混合溶液离心后得到沉淀物，将得到的沉淀物溶解在去离子水中形成鱼精蛋白‑纳米金刚石复合材料，纳米金刚石通过极性相互作用吸附鱼精蛋白硫酸盐后得到鱼精蛋白‑纳米金刚石复合材料，鱼精蛋白‑纳米金刚石复合材料的动力学尺寸为114nm‑115nm，表面zeta电位为33.5mV‑34.1mV；将miRNA与鱼精蛋白‑纳米金刚石复合材料按照溶质质量比1：4混合得到miRNA‑纳米金刚石‑鱼精蛋白复合物，动力学尺寸为170nm‑173.3nm，表面zeta电位为‑20.1mV‑‑21.2mV；再次吸附上鱼精蛋白硫酸盐后，得到的鱼精蛋白‑miRNA‑鱼精蛋白‑纳米金刚石的动力学尺寸为200nm‑201.5nm，表面zeta电位为18.5mV‑19.2mV；最外层吸附上叶酸后得到的叶酸‑鱼精蛋白‑miRNA‑鱼精蛋白‑纳米金刚石转染试剂的动力学尺寸为209.5nm‑210.3nm，表面zeta电位为‑25.8mV‑‑26.3mV；叶酸吸附是将叶酸溶解于pH＝8.0的磷酸盐缓冲溶液中后，再加入鱼精蛋白‑miRNA‑鱼精蛋白‑纳米金刚石。