云南红药片的质量控制方法

摘要

本发明涉及到一种复方中药——云南红药片的质量控制方法。本方法由以下步骤组成：一.定性鉴别：用超声处理的方法来提取供试品中的有效成分，用重楼皂苷A、B作为对照品来鉴别重楼中的指标成分重楼皂苷A、B，用人参皂苷Rb1、Rg1、三七皂苷R1作为对照品来鉴别三七中的指标成分人参皂苷Rb1、Rg1、三七皂苷R1；用紫金龙为对照药材，鉴别云南红药处方中的药材紫金龙；二.毒性成分限量：用乌头碱作为对照品，用以控制制黄草乌中乌头属内相关生物碱的限量；三.定量鉴别：用高效液相色谱法对其指标成分人参皂苷Rg1的含量进行测定。

主权项

1.一种云南红药片的质量控制方法，其特征在于由以下步骤组成：一、定性鉴别(1)取本品粉末，置显微镜下观察：草酸钙针晶成束或散在，长40～80～240μm；纤维淡黄色，棱形，壁厚，孔沟细；纤维成束或散离，壁厚，表面有纵裂纹，初生壁常与次生壁分离，两端常断裂成须状，或平截；石细胞卵圆形或类方形，壁厚，沟纹明显；(2)取本品5-12片，研细，加乙醇5-20ml，超声处理5-20分钟，滤过，取滤液1-5ml，加新制的氯化钠明胶试液1-4滴，产生白色混浊；另取滤液1-10ml，加1％三氯化铁乙醇溶液1-6滴，显蓝色；(3)取本品5-80片，研细，加乙醚20-120ml，超声处理1-20分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，加正丁醇10-80ml，放置过夜，超声处理5-50分钟，滤过，滤液置分液漏斗中，用氨试液洗1-6次，每次5-50ml，分取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5-10ml使溶解，作为供试品溶液；另取重楼皂苷A、B对照品，加甲醇制成每1ml各含1-6mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各1～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液1→10，在80-120℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点；(4)取(3)项的供试品溶液；另取人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml各含1-5mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液1→10，在80-120℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点；(5)取本品5-60片，研细，加氨试液1-10ml，氯仿20-100ml，振摇0.5-2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取紫金龙对照药材0.1-2g，同法制备对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水5-20℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙红色主斑点；二、毒性成分限量乌头碱限量取本品50-200片，研细，置具塞锥形瓶中，加乙醚80-300ml，振摇5-30分钟，加氨试液5-30ml，振摇10-60分钟，放置0.5-3小时，分取醚层，蒸干，加无水乙醇1-10ml使溶解，作为供试品溶液；另取乌头碱对照品，加无水乙醇制成每1ml含1-5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5-20μl，对照品溶液1-15μl，分别点于同一0.1-0.5％氢氧化钠制备的氧化铝G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上不出现斑点或出现的斑点应小于对照品的斑点；三、定量鉴别照高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1的含量；色谱条件与系统性适用性实验用辛烷基键合硅胶为填充剂；乙腈-水为流动相，流速0.5-2.0ml/min，柱温30-45℃，检测波长203nm；理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于4000；对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品适量，用甲醇制成每1ml含0.1-0.5mg人参皂苷Rg1的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品10-40片，精密称定，研细，取细粉0.5-5g，精密称定，加乙醚20-80ml，浸渍0.5-3小时，超声处理1-30分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣挥干乙醚，精密加入正丁醇20-80ml，称重，放置过夜，超声处理5-30分钟，，放冷，用正丁醇补足重量，混匀，滤过，精密量取续滤液10-50ml，置分液漏斗中，用氨试液洗1-5次，每次10-50ml，放置分层，分取正丁醇液置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解并定量转移至2-10ml量瓶中；加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别取对照品溶液和供试品溶液1-40μl，注入液相色谱仪，以外标法计算，即得；本品含三七以人参皂苷Rg1(C24H72O14)计算，每片不得少于0.1-1mg。