一种在茶树上直接播种齿瓣石斛种子培育种苗的方法

摘要

本发明公开了一种在茶树上直接播种齿瓣石斛种子培育种苗的方法。将胶膜菌(Tulasnella sp.)，制成真菌悬浮液，然后与野外采集的齿瓣石斛种子混匀制成种子‑真菌悬浮液。用保鲜膜在茶树树干上缠绕1至3圈，将种子‑真菌悬浮液均匀分散注入保鲜膜和树干之间的空隙位置，并在播种点附近扎孔。本发明简化了幼苗生产过程，明显降低生产成本，提高种苗量和幼苗回归到自然环境中后的存活率和幼苗生长速度，具有很好的环境适应性；当地居民在采集茶叶的同时可以收获石斛产品，起到增收的效果；不需要额外占用土地、建造栽培设施和化肥农药的使用，仅需要极低的制作种子‑真菌悬浮液的成本投入，具有很高的推广应用价值。

主权项

一种在茶树上直接播种齿瓣石斛种子培育种苗的方法，包括以下步骤：(1)采集野外自然结实并成熟但果荚尚未开裂的齿瓣石斛种子保存备用；(2)真菌悬浮液的制作：2.1培养基的制作：以锥形瓶10％体积的量将PDA液体培养基装瓶，封口后装入灭菌锅，于121℃，115KPa条件下灭菌20min，备用；2.2将活化培养3～10天的胶膜菌(Tulasnella sp.)，CGMCC No.9551接种于备用的PDA液体培养基，于23～28℃，120～200rpm条件下发酵培养5～10天；2.3用纱布过滤发酵液获取菌丝体，用无菌水冲洗菌丝体3～5次并沥水以去除残留的葡萄糖，将菌丝体和1～20倍质量的无菌水放入匀浆机打碎制成真菌悬浮液；(3)种子‑真菌悬浮液的制作：将齿瓣石斛种子与真菌悬浮液混匀制成种子‑真菌悬浮液，控制种子‑真菌悬浮液中有活力的齿瓣石斛种子密度为20～300个/ml；(4)茶树林种子直播4.1用普通保鲜膜在茶树树干上离地10cm以上的位置松散地缠绕1至3圈，用注射器取1～10ml的种子‑真菌悬浮液均匀分散注入保鲜膜和树干之间的空隙位置；然后在种子‑真菌悬浮液注射位置即每个播种点的附近用针刺破保鲜膜，使种子在萌发过程中和外界保持相通；4.2播种30天时可见种子陆续发育成原球茎，45～50天时多数原球茎发育成幼苗，此时应在有幼苗处对保鲜膜开孔放苗。