小分子肺癌抗体导向免疫毒素及其制备方法和用途

摘要

本发明公开了一种小分子肺癌抗体导向免疫毒素及其制备方法和用途。用经抗正常肺细胞抗血清包被的肺癌细胞免疫小鼠,取小鼠脾脏分离B细胞,与骨髓瘤细胞SP20杂交,经筛选获得一株对各种肺癌均有良好特异性和敏感性的抗体分泌细胞株LA1。提取LA1细胞的总RNA,逆转录成cDNA,用RT PCR扩增抗体的重链和轻链可变区,再用多肽基因片段连接重链、轻链可变区和免疫毒素,将重组基因装入质粒pGEX－4T－2,用该质粒转化大肠杆菌B121(λDE3),发酵培养该大肠杆菌,经裂解、分离、纯化、复性,获得高纯度抗体导向的免疫毒素。

主权项

1.一种小分子肺癌抗体导向免疫毒素，其特征在于：其基因和氨基酸序列为：ATG GGC AAG GAA TCC CGG GCC AAG AAA TTC CAG CGG CAG CAT ATGGAC TCA GAC AGT TCC CCC AGC AGC AGC TCC ACC TAC TGT AAC CAAATG ATG AGG CGC CGG AAT ATG ACA CAG GGG CGG TGC AAA CCA GTGAAC ACC TTT GTG CAC GAG CCC CTG GTA GAT GTC CAG AAT GTC TGTTTC CAG GAA AAG GTC ACC TGC AAG AAC GGG CAG GGC AAC TGCTAC AAG AGC AAC TCC AGC ATG CAC ATC ACA GAC TGC CGC CTG ACAAAC GGC TCC AGG TAC CCC AAC TGT GCA TAC CGG ACC AGC CCG AACGAG AGA CAC ATC ATT GTG GCC TGT GAA GGG AGC CCA TAT GTG CCAGTC CAC TTT GAT GCT TCT GTG GAG GAC TCT ACC GCA AAG AAG CTCAAC GAC GCA CAG GCA CCT AAG TCA GAT CAG GTC CAA CTG CAGGAG TCA GGG GGG GGC TTA GTG AAG CCT GGA GGG TCC CTG AAACTC TCC TGT GCA GCC TCT GGA TTC ACT TTC AGT AGC TAT GCC ATGTCT TGG GTT CGC CAG GCT CCA GAG AAG AGG CTG GAG TGG GTCGCA TCC ATT AAT TAT GGT GGT GAC ACC TAC TAT CCA GAC AAT GTGAAG GGC CGA TTC ACC ATC TCC AGA GAT AAT GCC GGG AAC ATC CTGTTC CTG CAA ATG AGC AGT CTG AGG TCT GAG GAC ACG GCC ATG TATTAC TGT GCA AGA GTT TCG TAC TAC GGT CGT ACC TAC ACA TAT GCTATG GAC TAC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC TCA GGTGGA GGC GGT TCA GGC GGA GGT GGC TCT GGC GGT GGC GGA TCGGAC ATT GAG CTC ACC CAG TCT CCA GCA CTC ATG GCT GCA TCT CCAGGG GAG AAG GTC ACC ATC ACC TGC AGT GTC AGC TCA AGT ATA AGTTCC AGC AAC TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAG TCA GAA ACC TCC CCCAAA CCC TGG ATC TAT GGC ACA TCC AAC CTG GCT TCT GGA GTC CCTGTT CGC TTC AGT GGC AGT GGA TCT GGG ACC TCT TAT TCT CTC ACAATC AGC AAC ATG GAG GCT GAA GAT GCT GCC ACT TAT TAC TGT CAACAG TGG AGT AGT TAC CCC CTC ACG TTC GGC TCG GGG ACC AAG TTGGAG ATC AAA CGG