一种真菌拮抗菌的快速筛选方法

摘要

本发明公开了一种真菌拮抗菌的快速筛选方法，该方法包括步骤一、收集目标真菌的孢子；二、准备至少三种培养液：待测菌培养液、对照菌培养液和LB细菌培养液；三、配制步骤二中对应数量的相同琼脂：取琼脂糖30‑50mg置于50ml烧杯中，加入1ml水，100℃水浴加热10min，使琼脂融化，取下烧杯并冷却至35℃等步骤。通过该方法快速测定待测菌对孢子的萌发率从而判断待测菌是否为真菌的拮抗菌，该方法试验周期短，能快速的筛选出真菌的拮抗菌，满足了实验要求。

主权项

一种真菌拮抗菌的快速筛选方法，本发明包括以下步骤：一、收集目标真菌的孢子；二、准备至少三种培养液：待测菌培养液、对照菌培养液和LB细菌培养液；三、配制步骤二中对应数量的相同琼脂：取琼脂糖30‑50mg置于50ml烧杯中，加入1ml水，100℃水浴加热10min，使琼脂融化，取下烧杯并冷却至35℃；四、制作步骤三中对应数量的琼脂基质：往每杯将要凝结的琼脂中以枪头分别注射步骤二中准备的培养液，并轻轻搅拌均匀，使培养液与琼脂的体积比为2‑10％，分别做成待测菌琼脂基质、对照菌琼脂基质和LB菌琼脂基质，所述每种琼脂基质中培养液与琼脂的体积比相同；五、分别将步骤四中的每种琼脂基质平铺于相应的载玻片上，厚度约1‑2mm，待其凝结，每种琼脂基质在载玻片上的尺寸相同；六、制作步骤五中相应数量的孢子平板：在凝结后的每一琼脂基质上喷洒少量无菌水，并分别加入等量的步骤一中收集的目标真菌的孢子，使其粘附于相应的琼脂基质上，分别形成待测菌孢子平板、对照菌孢子平板和LB菌孢子平板；七、将步骤六中每个孢子平板分别置于底部有浸湿滤纸的培养皿内，加盖保湿相同时间；八、将步骤七中各个培养皿再置于27‑30℃培养箱内继续保湿培养；九、分别于培养后6h、12h、24h，观察、计数各个培养皿上的孢子的萌发率。