发明名称 一种准确评定玉米黄曲霉毒素B1含量的方法
摘要 本发明涉及一种准确评定玉米黄曲霉毒素B1含量的方法,是将粉碎后玉米样品进行两步酶法(胃蛋白酶—胰酶)体外消化,取消化后的消化液以ELSIA方法进行其中黄曲霉毒素B1含量的测定,从而确定玉米样品中黄曲霉毒素B1的含量。取消化液以ELSIA方法进行黄曲霉毒素B1含量的测定,确定玉米样品中黄曲霉毒素B1的含量。目的是提供一种通过体外酶消化与ELISA测定相结合的快速准确测定玉米黄曲霉毒素B1含量且适于生产应用的方法,可以为养殖生产中饲料质量的保障提供支持。
申请公布号 CN105353120B 申请公布日期 2017.05.03
申请号 CN201510938305.1 申请日期 2015.12.15
申请人 山东农业大学 发明人 林海;焦洪超;范国燕;赵景鹏;王晓鹃
分类号 G01N33/558(2006.01)I 主分类号 G01N33/558(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种准确评定玉米黄曲霉毒素B1含量的方法,其特征在于利用体外消化的方法有效释放玉米中的结合态黄曲霉毒素B1,结合ELISA方法准确评定黄曲霉毒素B1的含量;包括以下步骤:(1)将玉米样品粉碎,过60目筛;(2)准确称取步骤1)所述样品1.0g,加入浓度为1.0mg/mL、pH=2的胃蛋白酶水溶液10~15mL,密封,35~40℃水浴、160~200r/min恒温振荡消化3h;(3)向步骤2)所述消化3h后的样品中加入浓度为1.0mol/L NaOH溶液0.1mL中和;(4)向步骤3)所述中和后的样品中加入浓度为2.5mg/mL胰酶水溶液10~15mL,混合均匀后转移到12000~14000D的透析袋中,封口;(5)将步骤4)所述封口后的透析袋放入200ml pH=7.6的磷酸盐缓冲液中,35~40℃水浴180~200r/min恒温振荡消化4h;(6)取步骤5)所述消化4h后、透析袋外消化液,以ELISA方法检测消化液中黄曲霉毒素B1的含量。
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