发明名称 一种提高币斑病菌基因组DNA提取质量的方法
摘要 本发明公开了一种提高草坪币斑病菌DNA提取质量的方法,包括如下步骤:培养皿中加入含有抗生素的MM培养基,在培养基表面铺上灭菌玻璃纸,挑取菌丝转移至培养基中间,25‑30℃黑暗条件培养7‑14d;刮取玻璃纸表面菌丝20‑50mg置于离心管中,通风干燥,往离心管中加入钢珠,液氮冷冻、磨碎菌丝;采用经典CTAB法提取得到基因组DNA,将基因组DNA溶解于TE缓冲液,静置24‑48h,离心,去除不溶于TE缓冲液的杂质。本发明通过使用MM培养基降低币斑病菌菌丝组织中的多糖含量,从而提高病原菌基因组DNA的提取质量,无需昂贵的仪器设备或DNA提取试剂盒,DNA提取质量显著提高、稳定性好且经济高效。
申请公布号 CN106591286A 申请公布日期 2017.04.26
申请号 CN201611004305.5 申请日期 2016.11.15
申请人 南京农业大学 发明人 胡健;杨静雅;李婕;马子元;刘清源
分类号 C12N15/10(2006.01)I;C12N1/14(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人 徐冬涛;邢贤冬
主权项 一种提高币斑病菌基因组DNA提取质量的方法,其特征在于包括如下步骤:步骤(1)、菌丝培养:培养皿中加入含有抗生素的MM培养基,在培养基表面铺设灭菌玻璃纸,挑取病原菌菌丝转移至培养基中间,25‑30℃黑暗条件培养7‑14d;步骤(2)、菌丝准备:刮取玻璃纸表面菌丝20‑50mg置于离心管中,通风干燥12‑18h,往离心管中加入钢珠,使用液氮冷冻、粉碎机磨碎菌丝用于DNA提取;步骤(3)、DNA提取:采用经典CTAB法提取得到基因组DNA,将基因组DNA溶于TE缓冲液,静置24‑48h,离心,去除不溶于TE缓冲液的杂质。
地址 211225 江苏省南京市溧水区白马镇国家农业科技园南京农业大学基地