一种人脐血来源调节性T细胞扩增培养基及其使用方法

摘要

本发明涉及一种改良的人脐血来源调节性T细胞扩增培养基及其使用方法。向RPMI1640培养基中添加占培养基体积10‑12％的经肝素抗凝的自体脐带血血浆，CD3/CD28抗体共表达的免疫磁珠，重组人白细胞介素2、2‑巯基乙醇、雷帕霉素、4‑羟乙基哌嗪乙磺酸、庆大霉素。将分离的细胞悬液接种在U型底的96孔板中，一般每1‑2天可以分孔扩增，扩增时间为3‑4周。该培养体系中所有试剂均为GMP级别或脐血自体来源，避免动物源性成分带来的风险，可作为第三方无关供者直接用于临床疾病治疗；使用改良培养基扩增的Treg细胞在生长速度，纯度，活性和淋巴细胞抑制功能等方面较传统培养体系更优越，有望作为第三方无关供者调节性T细胞应用于临床疾病治疗。

主权项

一种人脐血来源调节性T细胞扩增培养基，其特征在于，向RPMI1640培养基中添加占培养基体积10‑12％的经肝素抗凝的自体脐带血血浆、CD3/CD28抗体共表达的免疫磁珠、重组人白细胞介素2、2‑巯基乙醇和雷帕霉素，培养基中重组人白细胞介素2浓度为800IU/mL、2‑巯基乙醇浓度为50μmol/L、雷帕霉素浓度为100nmol/L。