改进多种蛋白质性质的方法

摘要

本发明提供了获得下述蛋白质的高效方法，所述蛋白质在工业、消费者或药物应用中具有一种或多种有益属性。在一些优选的实施方式中，本发明提供了通过筛选候选酶的缩略组生产用于给定应用的优质酶的方法。

主权项

提供酶变体文库的方法，所述方法包括：a)在至少一项感兴趣的测试中，对跨越ζ‑电势范围的多种探针酶变体加以测试，其中所述酶变体的所述ζ电势在‑40mV和+40mV之间，并且其中感兴趣的测试在匹配洗涤条件下的洗涤剂的pH和传导性的缓冲液中进行；b)鉴定所述ζ‑电势范围内的最优值，其与大于所述至少一项感兴趣的测试中的最大值的至少50％的值相关；c)提供处于所述ζ‑电势范围的所述最优值内的多种候选酶变体，其中所述酶变体文库富含具有在所述至少一项感兴趣测试中最大值的至少50％的值的成员，所述感兴趣的测试在所述洗涤条件下的洗涤剂中进行，其中所述酶是蛋白酶或淀粉酶；其中所述探针酶变体和所述多种候选酶变体是通过重组技术产生的、天然酶变体、体外合成的糖基化或磷酸化酶变体、和/或体外产生的酶缀合物；并且其中所述感兴趣的测试包括测量洗涤性能、底物结合、酶抑制、洗涤剂稳定性、热稳定性、反应速率、反应程度、和/或热活性；d)在所述至少一项感兴趣的测试中，测试所述多种候选酶变体和至少一种野生型酶；和e)鉴定具有改进的结果的酶变体，其中，所述野生型酶在所述至少一项感兴趣的测试中获得的性能指数值为1.0，而具有改进的结果的所述酶变体获得高于1.0的值。