午香草培育繁殖方法

摘要

午香草培育繁殖方法涉及一种植物的培育繁殖方法，特别涉及药物的培育繁殖方法。本发明操作步骤为：a.午香草外植体消毒处理的操作方法；b.无菌超净工作台的操作方法；c.培育薄壁细胞；d.午香草外植体愈伤组织增殖培养；e.午香草茎叶分化苗培养；f.午香草生根培养；g.炼苗移栽。本发明经多次试验育苗成功率和移栽后的成活率均在90％以上，实现了稳定的培育繁殖午香草，达到了投资少，经济效益高的目的；解决了午香草产种子少繁殖速度慢，面临绝种的危险。

主权项

午香草培育繁殖方法，其特征在于，其操作步骤为：a.午香草外植体消毒处理的操作方法：在晴天下午，切取午香草幼嫩叶片后，先用毛笔、牙刷、手术剪等工具轻轻清除幼叶表面的杂物，放于饱和洗衣粉液中浸泡5min，再放到清洁干净的自来水中小水冲洗30min之后用蒸馏水漂洗5次，然后移入无菌的超净工作台；b.无菌超净工作台的操作方法：先用75％的酒精浸泡10‑20s，再用0.1‑0.2％的升汞(HgCl2)浸泡消毒3‑6min，然后用无菌水冲洗5‑10次之后，再用无菌滤纸吸干幼叶表面水分，用无菌剪刀剪成长、宽约0.5‑1.0厘米，叶片面积约1平方厘米左右，最后用无菌接种工具在超净工作台内接种到愈伤诱导的培养基中培养；c.步骤b所述的午香草愈伤组织，是在无菌条件下，将午香草的幼叶、嫩茎等器官或组织的一部分切下来，放在适当的人工培养基上进行培养，使这些器官或组织进行细胞分裂，形成一团薄壁细胞；d.午香草外植体愈伤组织增殖培养，将步骤c诱导出的愈伤中组织切割成黄豆粒大小，置于午香草外植体愈伤组织增殖的培养基中，每天光照24小时，光照强度为2500LX，培养温度25±2℃，接种20—50天后开如长出午香草愈伤组织细胞团；e.午香草茎叶分化苗培养，把午香草愈伤组织细胞团分别接种到以MS为基本培养基，并添加浓度配比为0.2‑2.0的6‑BA，0.1‑0.5的IAA、0.2—1.0的NAA、3.0％的蔗糖、6g/L的琼脂、pH值5.5的经消毒灭菌的培养基中进行茎叶分化培养，约30‑50天后愈伤组织分化出丛生芽，将带有丛生芽的愈伤组织材料切成带有3‑5个丛生芽的芽块放到增殖培养基中，每瓶转接3块，培养40‑60天、当丛生芽苗长到2‑5cm时即可转入生根培养基中培养；f.午香草生根培养，当丛生芽苗长到高2‑5cm时，将其剪下转入1/2MS为基本培养基中，并添加浓度配比为0.05的6‑BA，0.5的NAA，20％的蔗糖，6g/L的琼脂，pH值5.5的生根培养基中，6‑10天开始长根，25‑30天即长成2‑3cm高的带根苗，经过40—50天即长出完整的3—5条根系；g.炼苗移栽，将步骤f所得的培养带根苗置于常温下存放5—7天，然后揭去瓶盖，炼苗3‑4天后取出幼苗、洗净根部的培养基，再按10cmⅹ30cm的株行距把幼苗移栽入蛭石等苗床中，并用塑料薄膜覆盖保持温度和湿度，经7‑10天苗成活后去掉薄膜进行正常的土肥水管理，其成活率可达90％以上。