一种金钱小榕的组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明根据金钱小榕的生长特性，以MS培养基为基础配制出适合金钱小榕组织培养的培养基，包括不定芽诱导、增殖和生根的培养基。使用本发明所述的用于不定芽诱导的培养基、用于继代增殖的培养基和用于无菌生根的培养基能有效提高繁殖系数和成苗率；种苗强壮，缩短上市时间，提高种植效益；能够有效解决金钱小榕严重供应不足的问题，也为种植者提供良好的经济效益。

主权项

一种金钱小榕的组织培养快速繁殖方法，(1)外植体选取与消毒：①选取生长健康无病虫害的金钱小榕的幼嫩茎作为外植体；②去除多余的叶片，用洗涤剂洗涤去除枝条表面的污垢，再用纸巾吸干；③在超净工作台上，先用70％酒精浸泡10‑30s，再用无菌水冲洗1次，3‑5min；④再用0.1‑0.3％的升汞溶液中消毒10‑15min，最后用无菌水洗涤3‑5次，每次3‑5min，得到消毒外植体；其特征在于，还包括以下步骤：(2)改良MS培养基的制备：改良MS培养基的配方为：在改良MS培养基中FeSO₄的浓度为50～60mg/L，其他组分及浓度与原MS培养基配方完全一致；(3)不定芽诱导：将步骤(1)得到的消毒外植体，用无菌手术刀片切下侧芽，然后接种于不定芽诱导培养基中，进行诱导培养4周，得到金钱小榕不定芽；诱导培养条件如下：温度为28±2℃，湿度为50‑80％，光照时间为12小时/天，光照强度为600‑800lx；所述不定芽诱导培养基的配方为：在所述改良MS培养基的基础上添加6‑BA和NAA，其中6‑BA的浓度为0.5‑2mg/L，NAA的浓度为0.05‑0.5mg/L；(4)继代增殖：将步骤(3)得到的金钱小榕不定芽接入继代增殖培养基，进行继代培养4周，得到金钱小榕从苗；继代增殖培养条件如下：温度为28±2℃，湿度为75‑85％，光照时间为12小时/天，光照强度为600‑1000lx；所述继代增殖培养基的配方为：在所述改良MS培养基的基础上添加6‑BA和NAA，其中6‑BA的浓度为1.5‑2.5mg/L，NAA为0.05‑0.5mg/L；(5)无菌生根：待步骤(4)获得的金钱小榕从苗长至1.5‑2cm高时进行诱导生根，切下单株，接种于生根培养基中，进行生根培养20‑30天，得到金钱小榕幼苗；生根培养条件如下：培养温度为28±2℃，湿度为75‑85％，光照时间为10‑15小时/天，光照强度为600‑800lx；所述无菌生根培养基的配方为：在所述改良MS培养基的基础上添加NAA，NAA的浓度为0.5‑3mg/L；(6)炼苗与移栽步骤(5)中金钱小榕幼苗生长至根长0.5‑1cm、苗高2‑4cm后，将培养瓶瓶盖打开，室内炼苗培养5‑7天；然后洗净根部培养基，用消毒后的岩棉包裹好组培苗根部，放入直径为5cm的镂空塑料杯中，移至塑料大棚。