一种qPCR鉴定牛肉的方法

摘要

本发明为一种qPCR鉴定牛肉的方法，涉及食品检测和动物分子生物学技术领域，通过设计1组特异性识别牛细胞色素b基因片段的引物，上游引物序列：5′‑aatacactacacatccgacac‑3′，下游引物序列：5′‑gacccgtaatataagcctcg‑3′，浓度均为2 pmol/μL；将牛肉总DNA的浓度调至2 ng/μL作为检测模板；制备10μL qPCR反应体系：2×KAPA SYBR Fast qPCR Master mix：5μL；上、下游引物各0.5μL；模板DNA：0.5μL；灭菌纯水3.5μL。再按照反应程序：95℃变性/3 s，63℃退火/30 s，72℃延伸反应/25 s，40次循环，实施qPCR。根据qPCR的结果分析，若在Ct值在16～29时出现特异性SYBR荧光信号，则判断样品为牛肉或是含有牛肉或牛的其他组织成份；反之不是或不含有牛肉或牛的其他组织成份。本发明为快速、准确地鉴定牛肉的方法，可直接用于鉴定牛肉或牛其他组织成份的试剂盒生产。

主权项

一种qPCR鉴定牛肉的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：设计特异性识别牛细胞色素b基因片段的1对引物；步骤2：将牛肉总DNA的浓度调至2 ng/μL作为样品PCR检测的模板；步骤3：使用步骤1的引物和步骤2的模板，借助qPCR扩增牛细胞色素b基因特定片段；步骤4：根据qPCR的Ct值判断样品是否为牛肉或是否含有牛肉或牛的其他组织成份。