高效液相色谱‑串联四级杆质谱联用同步测定气溶胶中左旋葡聚糖、甘露聚糖和半乳聚糖的方法

摘要

一种高效液相色谱‑串联四级杆质谱联用同步测定气溶胶中左旋葡聚糖、甘露聚糖和半乳聚糖的方法，包括：用超纯水对气溶胶样品中的左旋葡聚糖、甘露聚糖和半乳聚糖进行超声萃取，用高效液相色谱‑串联四级杆质谱联用仪进行检测：采用氨水作为流动相；质谱部分的离子源采用适宜极性分子分析的电喷雾电离方式，质谱方法采用多次优化后的离子源参数和化合物参数，在负离子和多反应监测模式下进行定性和定量分析。通过外标曲线法，L、M、G在0.01‑1μg/ml范围内线性关系良好，相关系数超过0.99，其中L的检出限小于0.005μg/ml，M和G均小于0.01μg/ml，实验重复性很好，L、M、G的重复性实验的相对标准偏差分别为1.31％，4.48％和1.31％，其加标回收率均达到97％以上。

主权项

一种高效液相色谱‑串联四级杆质谱联用同步测定气溶胶中左旋葡聚糖、甘露聚糖和半乳聚糖的方法，其特征在于：步骤包括：(1)用超纯水对气溶胶样品中的三种单糖左旋葡聚糖、甘露聚糖和半乳聚糖进行超声萃取，所得萃取液过滤后完成样品的前处理；(2)用高效液相色谱‑串联四级杆质谱联用测定样品中的左旋葡聚糖、甘露聚糖和半乳聚糖：色谱柱为阴离子交换柱，流动相为氨水‑超纯水，采用恒流速洗脱，流速为0.2‑0.5ml/min；(3)将步骤(1)所得的经过萃取的样品进样后，在步骤(2)中流动相的带动下进入柱温箱中的色谱柱中，柱温箱温度设定不超过柱子最高耐温度；三种单糖在流动相的带动下于色谱柱内洗脱分离后，各组分通过接口进入质谱检测；质谱的离子源采用电喷雾电离方式获得的气相离子进入质量分析器；(4)进入质量分析器后，采用质谱多反应监测分析方法，即选择多个母、子离子对同时进行检测，设定只有质荷比为160.9的母离子能通过一级质谱进入碰撞室，设定在碰撞室被打碎的碎片子离子中101.0,113.0和129.0能通过二级质谱并被最后的检测器检测；相同的母、子离子对的化合物参数相同；(5)结合目标物的保留时间和特征子离子对左旋葡聚糖、甘露聚糖和半乳聚糖进行定性，用丰度最高的160.9‑101.0离子对对三种目标物进行定量，定量方法采用外标曲线法。