白菜型油菜花粉的离体萌发培养测定花粉活力的方法

摘要

本发明特别涉及白菜型油菜花粉的离体萌发培养测定花粉活力的方法及其白菜型油菜花粉离体萌发培养液。一种白菜型油菜花粉的离体萌发培养测定花粉活力的方法，其主要特点在于包括以下步骤：1）花粉采集：2）花粉离体萌发及花粉管生长；3）花粉活力的测定。本发明的优点是使用本发明提供的白菜型油菜花粉离体萌发液体培养基，以BK为溶剂，包含组分有50 g·L^‑1聚乙二醇6000、150 g·L^‑1蔗糖、2mg·L^‑1赤霉素、10mg·L^‑1维生素B1，pH为6.5，35℃光照条件下培养，白菜型油菜花粉萌发率可达到75.3%，花粉管也能得到较好生长；由于添加了PEG，白菜型油菜花粉管生长较直，便于观察测量。

主权项

一种白菜型油菜花粉的离体萌发培养测定花粉活力的方法，其特征在于包括以下步骤：1）花粉采集：选取发育正常、无病虫危害的健壮白菜型油菜植株，于白菜型油菜盛花期选取已开花的花序，收集花粉；2）花粉离体萌发及花粉管生长：将花粉均匀播种在白菜型油菜花粉离体萌发液体培养基上，30℃～40℃恒温培养； pH为6.0～7.0；花粉离体萌发培养15min～25min后部分花粉开始萌发，花粉萌发后花粉管长度超过花粉粒直径，花粉管开始快速生长；3）花粉活力的测定:离体培养45 min～1h后，以花粉管长度大于花粉粒直径为花粉萌发标准，每处理重复3次，每重复随机观察3～5个视野，每视野观察花粉数30～80粒，统计花粉萌发率，花粉萌发率反应有生活力花粉所占比例；所述的白菜型油菜花粉离体萌发液体培养基，以BK为溶剂，其包含的组分有50g·L^‑1 ～100 g·L^‑1的PEG 6000（聚乙二醇6000）、130 g·L^‑1～150 g·L^‑1的蔗糖、1.5mg·L^‑1～2.5mg·L^‑1的赤霉素和8.5m g·L^‑1～10 mg·L^‑1的维生素B1，pH为6.0～7.0；所述的BK的组成为：H₃BO₃100 mg·L^‑1、Ca(NO₃)₂·4H₂O 300 mg·L^‑1、MgSO₄·7H₂O 200 mg·L^‑1和KNO₃ 100 mg·L^‑1，以蒸馏水为溶剂。