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一种从中华鲎尾中制备犬尿酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、中华鲎尾干粉的制备：将中华鲎尾自然晾晒干燥，在常温下，用药用粉碎机粉碎，得到干粉，装于密封袋中，于干燥器中保存备用；步骤二、称取已经打粉的中华鲎尾5份，每份1000g，分别置于5个2L的三角瓶中，按料液比1:3:16分别加入乙酸、乙酸乙酯和甲醇，封口后置于摇床中，在40℃，150rpm条件下进行第一次提取48h，抽滤，收集滤液；再向残渣中加入相应溶剂进行第二次提取，在同样的条件下提取24h，抽滤，收集滤液，待残渣中溶剂挥干后，再交换溶剂提取1次，进行第三次提取，在同样的条件下提取，合并滤液，45℃减压浓缩至圆底烧瓶中，回收溶剂，分别得有机提取物浸膏，合并提取物浸膏，得到中华鲎尾粗体物，4℃贮存备用；步骤三、中华鲎尾粗体物的初步分离纯化：将中华鲎尾粗体物用甲醇溶解后过滤，40℃减压浓缩后，用硅胶粉干法拌样，上6cm×35cm反相硅胶柱，用100%水进行洗脱，洗脱体积为2L，每250ml收集一个组分，共得到8个馏分，45℃进行减压浓缩后除去溶剂后，合并得到组分A；步骤四、组分A的分离纯化：组分A用适量甲醇溶解后，直接上SephadexLH20凝胶柱，用甲醇作为洗脱剂进行洗脱，控制流速为8‑9s/drop，使用自动收集器收集各馏分，每60min收集1管，共收集得到130管馏分；合并第123管至第130管的馏分，再进行减压浓缩，得到组分A8；步骤五、组分A8的分离纯化：组分A8用适量甲醇溶解后，直接上SephadexLH20正相硅胶柱，用甲醇作为洗脱剂进行洗脱，经若干次凝胶柱分离，最终收集得到40管馏分，合并24管至35管馏分得到样品，将该部分样品标记为组分A8‑24；步骤六、组分A8‑24的分离纯化：取组分A8‑24 加适量甲醇溶解后，过正相柱分离；用硅胶粉拌样，硅胶用石油醚饱和后装柱，样品上柱后，用石油醚与丙酮进行洗脱，收集石油醚：丙酮=1:10时的馏分，共60管，合并25管至40管，合并馏分后减压浓缩，蒸干溶剂后，制得犬尿酸。 |
