一种高纯度黑木耳腺苷的制备方法

摘要

本发明公开了一种高纯度黑木耳腺苷的制备方法。本发明采用分子印迹聚合物作为分离介质，提高了黑木耳腺苷的选择性效果，该聚合物对黑木耳腺苷总的吸附量可达8~15mg/g。本发明针对黑木耳腺苷制备了分子印迹聚合物，该聚合物对黑木耳腺苷具有特异性吸附作用，分离效率高，且提取的腺苷活性高、纯度大。

主权项

一种高纯度黑木耳腺苷的制备方法，其特征在于：具体操作方法依次按下列步骤：（1）黑木耳腺苷分子印迹聚合物的制备：称取纯度为98%以上的黑木耳腺苷标准品，溶于60~70倍重量的丙酮中，与甲基丙烯酸或丙烯酰胺功能单体，交联剂，引发剂混合，混合均匀后，超声处理10~20min，氮吹15min，密封，置于60℃水浴聚合反应24h，粉碎，过180目筛，烘干，置于烧杯中，加入黑木耳腺苷重量50倍的洗脱液，其中甲醇：乙酸的体积比为8:2，超声洗脱30min，抽滤，取滤渣重复上述过程，直至洗脱液在429nm波长检测无吸收，将洗脱后的滤渣置于烘箱中，烘干，得到黑木耳腺苷分子印迹聚合物；（2）将黑木耳原料粉碎至细度为80目，加入50~60倍重量的水，加入果胶酶、植物水解酶、复合纤维素酶充分酶解，制得黑木耳提取液，将提取液浓缩，喷雾干燥，获得黑木耳提取物，将粉末粉碎过50~60目筛，按照1:1~4比例称取黑木耳提取物和分子印迹聚合物，混合均匀，研磨均化5~10min，得到混合粉末；（3）将步骤（2）得到的混合粉末移入装有玻璃棉垫底的注射器中，再在混合粉末上方放置玻璃棉，压实；（4）将淋洗液倒入压实的注射器中，以1~2ml/min的流速淋洗，其中注射器中混合粉末的质量与淋洗液的体积比为1g:5~25ml，淋洗掉黑木耳提取物中除黑木耳腺苷以外的其他组分；（5）将洗脱剂倒入淋洗后的注射器中，以1~2ml/min的流速洗脱，其中注射器中混合粉末的质量与洗脱剂的体积比为1g:5~25ml，洗脱目标物为黑木耳腺苷。