从漆树木粉中提取具有抗氧化活性的黄颜木素和3,4’,7-三羟基二氢黄酮醇的方法

摘要

本发明涉及从漆树木粉中提取具有抗氧化活性的黄颜木素和3,4’,7-三羟基二氢黄酮醇的方法，属于植物提取物和天然产物化学的开发和应用领域。以漆树木粉为原料、经过提取、萃取、硅胶柱色谱和中低压色谱得到95%以上的黄颜木素和3,4’,7-三羟基二氢黄酮醇。本发明从漆树中得到具有高效抗氧化活性的成分，在50mg/L浓度以上时，对DPPH、ABTS和羟自由基的清除率高于>95%以上。该制备过程快速简单，是开发潜在的天然抗氧化剂的良好来源，具有很好的商业前景。

主权项

从漆树木粉中提取具有抗氧化活性的黄颜木素和3,4’,7‑三羟基二氢黄酮醇的方法，其特征在于由以下步骤组成：第一步将漆树木粉，干燥去渣，按质量体积比为1:10~1:30(g:mL)，加入质量分数为50~95%的乙醇或甲醇水溶液，减压回流提取2~3次，每次1~3h，过滤，滤液合并，于40~60℃下减压蒸发除去溶剂，得到含水粗提液；第二步粗提液按质量比1:3~1:10(g:mL)加入蒸馏水，搅拌溶解，加入石油醚萃取1~5次，分离，在40~60℃下减压蒸发除去溶剂，得到石油醚萃取物；水层继续用乙酸乙酯萃取1~5次，分离，在40~60℃下减压蒸发除去溶剂，干燥得到乙酸乙酯萃取物；第三步将乙酸乙酯萃取物与硅胶填料按质量比1:15‑50吸附，柱长50‑150 cm，柱直径4‑20 cm，采用不同比例石油醚与乙酸乙酯进行洗脱，收集抗氧化活性较高的石油醚:乙酸乙酯体积比为7:3‑3:7(v:v)的部位，真空浓缩，回收溶剂，得到富含黄颜木素和3,4’,7‑三羟基二氢黄酮醇的提取物；第四步将富含黄颜木素和3,4’,7‑三羟基二氢黄酮醇的提取物与中低压色谱填料按质量比1:15‑50吸附，中压柱柱长20‑80 cm，柱直径2‑8 cm，采用不同比例的洗脱剂进行洗脱，柱压为0.5‑10 MPa, 检测波长220‑280 nm，流速3‑50 mL/min，分别收集黄颜木素和3,4’,7‑三羟基二氢黄酮醇部位，真空浓缩，回收溶剂，得到黄颜木素和3,4’,7‑三羟基二氢黄酮醇样品，将黄颜木素和3,4’,7‑三羟基二氢黄酮醇进行HPLC分析，含量为95%以上；第五步将黄颜木素和3,4’,7‑三羟基二氢黄酮醇进行体外抗氧化活性测试，黄颜木素清除DPPH自由基的IC₅₀值为19.54mg/L，清除ABTS自由基的IC₅₀值为25.45mg/L，清除羟自由基的IC₅₀值为52.97 mg/L，5～50mg/L黄颜木素的总还原力为0.175~1.108，铁离子还原力为53～260 μmol/L；3,4’,7‑三羟基二氢黄酮醇清除DPPH自由基的IC50值为28.97mg/L，清除ABTS自由基的IC₅₀值为27.58mg/L，清除羟自由基的IC50值为57.68 mg/L，5～50mg/L3,4’,7‑三羟基二氢黄酮醇的总还原力为0.177~0.875，铁离子还原力为31～144 μmol/L。