用于婴儿过度啼哭的益生菌

摘要

本发明提供了包含10⁴至10¹²cfu/g的戊糖片球菌细胞的细菌组合物，所述戊糖片球菌细胞除了其它特征外具有诱导白介素-10的生成以降低肠道中的炎症的能力。如此，细菌组合物可用于改善婴儿中的过度啼哭。特别地，戊糖片球菌细胞来自以CECT 8330保藏的菌株。细菌组合物可以为食物补充物、药物、婴儿配方乳品、食用产品和食物产品的形式。特别地，组合物为油性悬浮液形式的婴儿食物补充物形式。

主权项

一种细菌组合物，其包含10⁴至10¹²cfu/g的戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)细胞，该戊糖片球菌细胞具有诱导白介素‑10生成的能力，其中如表示为标准化增加的在存在戊糖片球菌细胞的情况中由THP‑1巨噬细胞进行的白介素‑10生成在通过下述步骤测定所述标准化增加时高于由阴性对照进行的白介素‑10生成，所述阴性对照是在缺乏戊糖片球菌细胞的情况中的THP‑1巨噬细胞：(a)将THP‑1单核细胞分化成巨噬细胞，其通过在具有10％胎牛血清(FBS)，以及具有至终浓度0.16μM的佛波醇12‑肉豆蔻酸酯13‑乙酸盐(phorbol 12‑myristate 13‑acetate,PMA)的洛斯维帕克纪念研究所(Roswell Park Memorial Institute,RPMI)1640培养基中培养自英格兰公共卫生部门(Public Health England)的细胞保藏中心，产品目录号88081201获得的THP‑1单核细胞细胞系进行；(b)在24孔ELISA板中在具有10％FBS的RPMI 1640培养基中培养THP‑1巨噬细胞至终浓度10⁶个巨噬细胞/孔；(c)将所述THP‑1巨噬细胞与终浓度10ng/ml的脂多糖(LPS)一起温育2.5小时，并且用杜伯科(Dulbecco)氏磷酸盐缓冲盐水培养基(D‑PBS)清洗所述THP‑1巨噬细胞；(d)通过在Man，Rogosa和Sharpe培养基(MRS)中于37℃在5％CO₂环境中培养过夜准备好戊糖片球菌细胞培养物；(e)对每个ELISA‑孔添加500μl具有10％FBS的RPMI 1640培养基和合适量的戊糖片球菌细胞稀释液以获得最终比率25:1，即2.5x10⁷cfu的戊糖片球菌细胞:10⁶个THP‑1巨噬细胞；(f)于37℃将所述THP‑1巨噬细胞与所述戊糖片球菌细胞一起温育2.5小时，或者在相同条件下不与所述戊糖片球菌细胞一起温育，作为阴性对照；(g)用D‑PBS培养基清洗所述THP‑1巨噬细胞以除去所述戊糖片球菌细胞，随后对所述THP‑1巨噬细胞添加具有10％FBS的补充有50μg/ml庆大霉素、10μg/ml氨卡青霉素和12μg/ml氯霉素的RPMI 1640培养基，于37℃于5‑7％CO₂温育，并且在5和24小时时采集等分试样；(h)将所述等分试样离心，并且通过流式细胞术测定上清液以量化白介素‑10；并且(i)用公式(IL10_24h‑IL10_5h)/IL10_5h计算白介素‑10浓度的标准化增加；其中IL10_5h和IL10_24h分别是在5和24小时时以pg/ml计的白介素‑10浓度。