明日叶叶片组织培养快繁技术

摘要

本发明公开了一种明日叶叶片组织培养快繁技术，选取明日叶叶片，用流水冲洗,75％酒精溶液浸泡，无菌水冲洗，放入0.1％升汞溶液中消毒，之后再用无菌水冲洗；切块；种于愈伤组织诱导培养基中培养20-30天叶片切口处长出愈伤组织团；再将愈伤组织团切块,转接至愈伤组织增殖培养基上培养20-30天对愈伤组织增殖；将增殖的愈伤组织切块，转接于丛生芽诱导培养基中进行培养30天分化产生丛生芽；将丛生芽基部的愈伤组织切除，分割为单个芽，将芽接种于生根培养基中培养20天得到再生植株幼苗；驯化练苗一周后移栽入灭菌处理的椰壳土中直至幼苗成活。本发明的有益效果是明日叶叶片做繁殖材料，成本低，材料来源广。

主权项

明日叶叶片组织培养快繁方法，其特征在于按照以下步骤进行：    （1）选取明日叶叶片，用流水冲洗，放入无菌操作台上备用；    （2）用75%酒精溶液浸泡，无菌水冲洗，放入0.1%升汞溶液中消毒，之后再用无菌水冲洗；    （3）用无菌滤纸吸干叶片的水，然后切块；    （4）将叶片接种于愈伤组织诱导培养基中，置于24℃培养箱中2000Lx光强下培养，光照条件为每天16小时光照，8小时黑暗，培养20‑30天叶片切口处长出愈伤组织团；    （5）再将愈伤组织团切块，转接至愈伤组织增殖培养基上，培养温度25℃，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养20‑30天对愈伤组织增殖；    （6）将增殖的愈伤组织切块，转接于丛生芽诱导培养基中进行培养，培养温度25℃，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养30天分化产生丛生芽；    （7）将丛生芽基部的愈伤组织切除，分割为单个芽，将芽接种于生根培养基中，培养温度25℃，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养20天得到再生植株幼苗；（8）选取健壮幼苗于组培瓶中，移至自然环境条件下3天，打开组培瓶盖3天驯化炼苗，经过驯化炼苗一周后移栽入灭菌处理的椰壳土中，上覆薄膜，浇水，保持空气湿度，1周后逐渐打开薄膜，直至幼苗成活；所述愈伤组织诱导培养基为MS＋1mg/L 6‑BA＋3mg/LNAA；所述愈伤组织增殖培养基为MS＋6‑BA 2mg/L＋2,4‑D 1mg/L；所述丛生芽诱导培养基为MS＋6‑BA1mg/L＋NAA0.5mg/L；所述生根培养基为1/2MS＋0.02mg/L NAA。