一种高度纯化胰激肽酶原的方法及提高胰激肽酶原稳定性的药物组合物

摘要

本发明公开了一种高度纯化胰激肽酶原的方法及含有胰激肽酶原的药物组合物。本发明的技术方案是以猪胰为原料提取、沉淀猪胰制成丙酮粉后，灵活运用醋酸提取、丙酮沉淀，乙醚脱脂脱水，氯化钠-氨水、丙酮协同除杂，离子交换树脂DEAE-琼脂糖快胶分步洗脱等传统与现代相结合的蛋白纯化技术，高度纯化胰激肽酶原。本发明具有生产周期短，对化学和热稳定性好、成本低的特点，非常适用于规模化大生产。

主权项

一种高度纯化胰激肽酶原的方法及含有胰激肽酶原的药物组合物，其特征在于，该方法包括如下步骤：（1） 醋酸提取：将猪胰脏制成丙酮粉后，加醋酸溶液搅拌提取，离心，得上清液；（2）丙酮沉淀：收集上清液，加入丙酮沉淀；沉淀用丙酮、乙醚脱脂、脱水，干燥，得胰激肽酶原粗品；（3）氯化钠‑氨水、丙酮协同除杂：将粗品用氯化钠溶液溶解，用氨水调PH，搅拌混合，过滤，得滤液；将滤液中加入丙酮沉淀；沉淀用丙酮、乙醚洗涤，干燥，得胰激肽酶原中间品； （4）离子交换层析：将胰激肽酶原中间品溶于醋酸缓冲液中，离心，得上清液；取上清液，上DEAE‑琼脂糖快胶柱吸附，吸附平衡后，用含氯化钠的醋酸缓冲液洗脱至基线，再用含氯化钠的醋酸缓冲液洗脱，收集洗脱液；将洗脱液透析脱盐，冻干，得胰激肽酶原精品。