灵芝高产菌株选育方法

摘要

本发明公开了灵芝高产菌株选育方法，操作方法采用菌种活化、培养、选择原始高产菌种用于发酵生产、四至五代传代培养，当菌种的质量下降时，对其进行外部刺激，经过外部刺激选择筛选优质的菌株进行扩培培养；当新的复合培养液中的菌种出现质量下降时，重复进行外部刺激的方法。本发明为了意在提供一种缩短菌株保藏环节，降低了菌种活化的培养周期，能大量筛选出高产灵芝多糖的菌株选育方法。

主权项

灵芝高产菌株选育方法，其特征在于：其操作步骤如下：A、菌种活化：取韩国短柄赤芝菌种和日本鹿角灵芝菌种，韩国短柄赤芝菌种与日本鹿角灵芝菌种的比例关系为1:1，将两种菌种用PDA基础培养基于28℃震荡培养5~7d；B、在其中一种菌种的稳定期将其接种在PDA复合培养基中，放置在28℃的摇床中震荡培养4~6d，另一种菌种在对数生长期将其接种在PDA复合培养基中，放置在28℃的摇床中震荡培养2~4d，PDA复合培养基是在PDA基础培养基的基础之上加入1.5%磷酸二氢钾和0.75%硫酸镁；C、选择原始高产菌种用于发酵生产；D、将步骤C的高产菌种通过四至五代传代培养，当菌种的质量下降时，对其进行外部刺激，E、外部刺激：在无菌环境下，使用20ml匀浆器对菌液进行匀浆处理，再将匀浆后的菌液按照10%的接种量接种在多个新的复合培养液培养；F、选择筛选优质的菌株进行扩培培养；G、当步骤Ｅ中新的复合培养液中的菌种出现质量下降时，重复操作步骤E、F。