一种两核苷酸合成焦测序定量检测甲基化的方法

摘要

本发明公开了一种两核苷酸合成焦测序定量检测甲基化的方法，将基因组DNA经亚硫酸氢盐转化后的PCR产物进行两核苷酸合成焦测序，连续记录每个测序反应得到包括两核苷酸种类及其核苷酸合成数目的测序编码信息。通过设定已确定的目标区域序列中所有CG位点中碱基C均不同程度的转化成T，再利用两核苷酸合成焦测序得到的信息，进行关联分析，实现目标区域序列中甲基化的定量分析。本发明能够大幅度提高测序长度，拓宽了传统焦测序的分析范围，适合单样本PCR产物、以及混合样本PCR产物序列的甲基化分析。

主权项

一种两核苷酸合成焦测序定量检测甲基化的方法，其特征在于：其步骤包括：1)DNA提取；2)亚硫酸氢盐处理；3)PCR扩增；4)测序；5)关联分析；所述步骤4)的测序方法为：每个测序反应同时加入两种不同的核苷酸，得到由连续单个测序信息构成的一组测序编码信息。