发明名称 一种检测羊四种病原菌的多重PCR检测用引物及检测方法
摘要 本发明公开了一种检测羊四种病原菌的多重PCR检测用引物及检测方法,所述引物分别为:肺炎克雷伯氏菌上下游引物、奇异变形杆菌上下游引物、大肠杆菌上下游引物和沙门氏菌上下游引物;所述检测方法采用引物,分别以肺炎克雷伯氏菌DNA、奇异变形杆菌DNA、大肠杆菌DNA、沙门氏菌DNA为模板进行多重PCR扩增反应,并将PCR 扩增反应产物加入上样缓冲液后,置于含溴化乙锭的琼脂糖凝胶中,进行电泳检测,验证引物的特异性。本发明的有益效果是:只需要常规仪器就可以具有高敏感性的分子检测方法,这种方法的检测敏感性高,同时不需要复杂的操作系统,可以在普通实验室条件下实施检测,并具有操作简单、敏感性高、快速等特点。
申请公布号 CN105087814A 申请公布日期 2015.11.25
申请号 CN201510609581.3 申请日期 2015.09.23
申请人 山东农业大学 发明人 朱瑞良;魏凯;胡莉萍;钟世勋;彭军
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/10(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12R1/22(2006.01)N;C12R1/19(2006.01)N;C12R1/42(2006.01)N;C12R1/37(2006.01)N 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 济南智圆行方专利代理事务所(普通合伙企业) 37231 代理人 卜爱华
主权项 一种检测羊四种病原菌的多重PCR检测用引物,其特征在于,所述引物为:肺炎克雷伯氏菌上游引物,其核苷酸序列如SED ID NO:1所示,肺炎克雷伯氏菌下游引物,其核苷酸序列如SED ID NO:2所示,奇异变形杆菌上游引物,其核苷酸序列如SED ID NO:3所示,奇异变形杆菌下游引物,其核苷酸序列如SED ID NO:4所示,大肠杆菌上游引物,其核苷酸序列如SED ID NO:5所示,大肠杆菌下游引物,其核苷酸序列如SED ID NO:6所示,沙门氏菌上游引物,其核苷酸序列如SED ID NO:7所示,沙门氏菌下游引物,其核苷酸序列如SED ID NO:8所示。
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