黄金锦络石的组织培养方法

摘要

本发明涉及一种植物的组织培养方法，具体涉及金叶络石的组织培养方法，属于生物技术领域。按照本发明提供的技术方案，黄金锦络石的组织培养方法，其通过无菌材料的选取、诱导培养、增殖培养、生根培养和炼苗与移栽得到黄金锦络石。本发明克服了黄金锦络石扦插繁殖率低，成活率不高等特点，导致黄金锦络石的价格偏高等缺点，通过组织培养的方法提高黄金锦络石的繁殖系数，促进生长和提高成活率。

主权项

黄金锦络石的组织培养方法，其特征是步骤为：（1）无菌材料的选取：选取生长健壮，带有腋芽的一年生黄金锦络石枝条为外植体；在自来水下用洗涤剂冲洗2h后，在超净工作台上用质量浓度为75%的酒精消毒10~40s，然后用无菌水冲洗3~5遍，再用质量浓度为5%~30%的次氯酸钠溶液消毒10~30min，然后用无菌水冲洗4~6遍，用无菌滤纸吸干多余分水分后备用；（2）诱导培养：将步骤（1）中灭菌好的一年生枝条切成多个茎段，每个茎段带有腋芽；将茎段接种到不定芽的诱导培养基上；培养30天时间，培养条件温度在23~26℃，光照强度为1500~2000Lux，光照时间12h；（3）增殖培养：将步骤（2）中长出的不定芽切下，接种到增殖培养基上， 7天之后，芽基部会长出多个丛生芽，28天转接一次，将丛芽单个切下，接入新的增殖培养基中继续培养；培养条件温度在23~26℃，光照强度为1500~2000Lux，光照时间12h；（4）生根培养：选取步骤（3）中生长健壮，高度2~4cm的丛生苗切成单株接种到生根培养基上；30天后，基部长出主根和须根，主根长度达到3~6cm；（5）炼苗与移栽：将步骤（4）中高度大于3cm，叶片数在4~6片、根系长度在2~5cm的组 培苗进行炼苗；打开瓶盖7天，使其适应外界环境；7天后洗掉根部的培养基，用800倍的多菌灵浸泡5~30min，移栽至大棚内，适度遮光，即可；步骤（2）所述诱导培养基为MS培养基+0.5~1.0mg/L 6‑苄氨基腺嘌呤+0.1~1.0mg/L 萘乙酸+0.1~0.5mg/L苯基噻二唑基脲+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，调节pH为5.8；步骤（3）所述增殖培养基为MS培养基+0.5~3.0mg/L6‑苄氨基腺嘌呤+0.1~0.5mg/L萘乙酸+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，调节pH为5.8；步骤（4）所述生根培养基为1/2MS培养基+0.1～1.0 mg/L吲哚丁酸+0.1～0.5 mg/L 萘乙酸+30 g/L蔗糖+7g/L琼脂粉+1%~4%活性炭，调节pH为5.8。