一种基于浊点萃取的枸杞多糖除蛋白方法

摘要

本发明公开了一种基于浊点萃取的枸杞多糖除蛋白方法，涉及生物工程技术领域。该方法基本步骤如下：向中加入配制温敏嵌段共聚物聚环氧乙烷-聚环氧丙烷-聚环氧乙烷（EOPOEO）溶液，并将其与枸杞粗多糖水溶液混合，该体系在温度诱导下发生液液相分离。在聚合物相的作用下，枸杞多糖中的杂质蛋白质将被成功去除。相分离后，体系上相与乙醇混合，沉淀得到多糖成品。同时，将温敏聚合物富集的下相降温以沉淀大部分蛋白质，然后通过调节pＨ值、外加电解质以及加热等多步骤的综合操作形成二次浊点萃取体系，成功地对下相中的温敏聚合物进行了回收再利用。是一种工艺流程更为简单、成本低廉、绿色环保的枸杞纯多糖的分离纯化方法。

主权项

一种基于浊点萃取的枸杞多糖除蛋白方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）将新型温敏嵌段共聚物聚环氧乙烷聚环氧丙烷聚环氧乙烷EOPOEO与蒸馏水混合，制备EOPOEO水溶液；（2）向步骤（1）所得的EOPOEO水溶液中加入枸杞粗多糖溶液，得混合体系，使用磷酸氢二钠‑柠檬酸缓冲液调节体系pH值为4‑8，振荡混合，分相静置，形成双水相体系，分离得到上相和下相；（3）将步骤（2）分离所得的上相减压浓缩，得浓缩液，再将浓缩液与95%的乙醇混合均匀，静置，得到纯化枸杞多糖；（4）将步骤（2）分离所得的下相静置以沉淀蛋白质，离心取上层清液，然后用PBS溶液调节上层清液pH值到6以上，同时向上清液中加入柠檬酸钠，然后升温后分相，将下层相分出以回收EOPOEO。