一种大丽轮枝菌的单孢分离纯化方法

摘要

本发明涉及一种大丽轮枝菌的单孢分离纯化方法，主要包括以下步骤：用直径1mm的玻璃毛细管在水琼脂平板上打取水琼脂培养基圆柱体，用灭菌针挑至经过灭菌的载玻片上；将大丽轮枝菌菌株在PDA固体培养基中活化，于察氏液体培养基内培养，在显微镜下统计孢子浓度，将孢子浓度调至10²-10⁶cfu制成孢子悬浮液；吸取1μL孢子悬浮液，滴至载玻片上的水琼脂圆柱体表面，将其移至培养皿内25℃恒温培养，显微镜检测载玻片，将含有已萌发产生芽管的单个分生孢子的圆柱体转移至PDA平板上25℃培养，完成单孢分离。此方法操作简单，一般操作人员均可完成，适合于大批量分离，分离成功率较高，此方法还适用于产生小型分生孢子的其他真菌。

主权项

一种大丽轮枝菌的单孢分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)配制水琼脂培养基、PDA固体培养基和察氏液体培养基，并制备水琼脂平板和PDA平板待用；(2)选用直径1mm的玻璃毛细管，在水琼脂平板上打取水琼脂培养基圆柱体，用灭菌挑针将其移至经过灭菌的载玻片上；(3)将大丽轮枝菌菌株在PDA培养基中活化后置于察氏液体培养基内培养；(4)过滤步骤(3)得到的培养物，在显微镜下统计孢子浓度，用无菌水将孢子浓度调至10²‑10⁶cfu，制成孢子悬浮液；(5)吸取1μL孢子悬浮液，滴至载玻片上的水琼脂圆柱体表面，将载玻片移至培养皿内，用封口膜封口，25℃恒温箱内培养；(6)显微镜检测步骤(5)获得的载玻片上的水琼脂圆柱体，将含有已萌发产生芽管的单个分生孢子的水琼脂圆柱体转移至PDA平板上培养，观察菌落生长情况。