发明名称 用于检测结核分枝杆菌的寡核苷酸和方法
摘要 本发明提供了可用于对编码pab(结核分枝杆菌来源的抗原蛋白)的pab基因或来自该基因的RNA进行特异切割、扩增、及高灵敏检测和鉴定的寡核苷酸。另外,本发明还提供了可有效地对来自结核分枝杆菌pab基因的RNA进行特异扩增、高度灵敏检测和鉴定的寡核苷酸组合,以及使用其检测结核分枝杆菌的方法。
申请公布号 CN100351374C 申请公布日期 2007.11.28
申请号 CN02802506.7 申请日期 2002.07.24
申请人 东曹株式会社 发明人 土屋滋夫;益田升佳;丸山高广;松叶隆雄;石黑敬彦
分类号 C12N15/00(2006.01);C12Q1/68(2006.01);G01N33/566(2006.01);G01N33/53(2006.01);G01N33/58(2006.01);G01N33/569(2006.01) 主分类号 C12N15/00(2006.01)
代理机构 北京市中咨律师事务所 代理人 黄革生;隗永良
主权项 权利要求书1.使用RNA扩增程序扩增pab基因,即结核分枝杆菌的一个基因元件的方法,包括以下步骤:以来自样品中的所述pab基因的RNA为模板,用RNA依赖的DNA聚合酶、与所述RNA有同源序列的第一引物、与所述RNA有互补序列的第二引物来形成cDNA,其中第一或第二引物的5’区域添加了具有RNA聚合酶启动子序列的序列,由此产生RNA-DNA双链;用核糖核酸酶H消化所述RNA-DNA双链中的RNA以形成单链DNA;然后以所述单链DNA为模板,用DNA依赖的DNA聚合酶形成含有启动子序列的双链DNA,其中所述启动子序列可允许所述RNA或者含有所述RNA的互补序列的RNA实现转录,在RNA聚合酶存在的条件下所述双链DNA产生RNA转录产物,接着所述RNA转录产物被用作模板通过所述RNA依赖的DNA聚合酶合成cDNA;所述方法的特征在于,由SEQ.ID.No.33组成的寡核苷酸被用作第一引物,其中所述序列具有与待扩增的结核分枝杆菌pab基因的部分RNA序列同源的序列;由SEQ.ID.No.40组成的寡核苷酸被用作第二引物,其中所述序列具有与结核分枝杆菌pab基因的部分RNA序列互补的序列。
地址 日本山口县