一种低血清高效培养鸡毒支原体弱毒株培养基及其制备方法

摘要

本发明涉及低血清高效培养鸡毒支原体弱毒株培养基及其制备方法，属于兽医生物学技术领域。包括(1)基础培养基（2）辅助培养基，主要有MEM、酵母浸出粉、胰蛋白胨，葡萄糖，无机盐等组成，该培养基能够既保证半成品生长滴度高而且稳定。用本发明方法制备的半成品菌液效价高达10¹¹CCU/ml;同时该培养基采用降低猪血清培养鸡毒支原体，减轻了异源体猪血清对鸡体的过敏应激反应，既考虑到动物的生物安全，又提高了抗原效价，而且降低了生产成本。

主权项

一种低血清高效培养鸡毒支原体弱毒株培养基，其特征是所述培养基的制备方法如下：基础培养基成分如下：（1）MEM                       6‑7g；（2）酵母浸出粉                  2‑4g；（3）胰蛋白胨                    6‑8g；（4）葡萄糖                      6‑8g；（5）质量浓度为1%的酚红溶液     1‑2ml；（6）Na₂HPO₄·12H₂O              1‑2g；（7）KH₂PO₄                                0.05‑0.09g；（8）NaCl                        2‑3g；（9）蒸馏水                      1000ml；取上述（1）‑（8）成分逐一溶入1000ml蒸馏水，在116℃灭菌30min，待冷却后，在无菌条件下加入下列辅助培养基成分；辅助培养基：（10）猪血清                                            40‑50ml；（11）质量浓度为20%新鲜酵母浸出液           80‑90ml；（12）过滤除菌的质量浓度为3%谷氨酰胺      90‑100ml；（13）质量浓度为10%精氨酸溶液                  20ml；（14）青霉素                               0.002‑0.015mg/ml；用1mol/L氢氧化钠溶液调整pH至7.6‑7.8。