一种长保质期的液态复合生物菌肥及其制备方法与应用

摘要

一种长保质期的液态复合生物肥料及其制备方法和应用，所述液态复合生物菌肥的组成包括微生物菌体、复合营养素、菌体保护剂和添加剂；其重量份数组成为，微生物菌体2-5，复合营养素80-130，菌体保护剂10-30，添加剂0.5-3.0，其中微生物菌体是以发酵液离心后的沉淀湿重计。所述微生物菌体的组成包括：苏云金芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌，其中总活菌数达5×10⁸-5×10⁹个/mL。本发明所述液态复合生物菌肥可用作生物农药，可直接应用于植物表面喷施，或施用于浸种、灌根等，具有抗虫、解磷、解钾、解有机质、抗虫害等效果且保质期长。

主权项

一种液态复合生物菌肥，所述液态复合生物菌肥的组成包括微生物菌体、复合营养素、菌体保护剂和添加剂；其重量份数组成为，微生物菌体2‑5，复合营养素80‑130，菌体保护剂10‑30，添加剂0.5‑3.0，其中微生物菌体是以发酵液离心后的沉淀湿重计；所述微生物菌体的组成包括：苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amylolquefaciens)，其中总活菌数达5×10⁸‑5×10⁹个/mL；所述微生物菌体中四种菌活菌数比例如下：苏云金芽孢杆菌:巨大芽孢杆菌:胶质芽孢杆菌:解淀粉芽孢杆菌＝1‑2:2‑3:2‑3:1‑2；所述复合营养素的重量份数组成为：磷酸二氢钾50‑150，EDTA‑Ca25‑30，EDTA‑Mg或EDTA‑Mg与MgSO₄·7H₂O二者混合物50‑80，EDTA‑Zn或EDTA‑Zn与ZnSO₄·7H₂O或二者混合物0.15‑0.18，EDTA‑Mn或EDTA‑Mn与MnSO₄·H₂O或二者混合物0.3‑0.5，EDTA‑Fe0.1‑0.3，EDTA‑Cu0.06‑0.08，硼酸0.1‑0.3，腐植酸5‑15，大豆蛋白20‑100，复合氨基酸50，海藻粉20‑100；所述菌体保护剂为细胞固定化载体中的一种或几种；所述添加剂为有机酸中的一种或几种；所述液态复合生物菌肥的生产方法如下：(1)菌种活化及种子液制备：将苏云金芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌菌株分别进行活化并培养制得种子液；(2)发酵培养：将培养好的苏云金芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌的种子液分别以8％‑10％的接种量接种至5L发酵罐，发酵培养基均为3号培养基，37℃～40℃，转速300rpm，通风比1:1，发酵15‑18h后收集发酵液；将培养好的胶质芽孢杆菌的种子液以8％‑10％的接种量接种至5L发酵罐，发酵培养基为4号培养基，37℃～40℃，转速400rpm，通风比1:1，发酵15‑18h后收集发酵液；所述3号培养基组成：以质量百分比计，1.0％‑1.2％葡萄糖，0.5％‑0.6％K₂HPO₄·3H₂O，0.3％‑0.5％KH₂PO₄，0.1％‑0.2％尿素，0.4％‑0.6％酵母粉，0.35％‑0.45‰MgSO₄·7H₂O，其余为水，pH7.0‑7.2；所述4号培养基：以质量百分比计，1％蔗糖，0.5％K₂HPO₄·3H₂O，0.5‰酵母粉，0.02‰FeCl₃·6H₂O，0.4‰CaCO₃，0.2‰MgSO₄·7H₂O，其余为水，pH7.0；(3)菌体收集与固定：将步骤(2)收集的四种发酵液混合，4℃，3000rpm‑5000rpm，8min‑10min离心，弃去上清，收集菌体，菌体用混合发酵液总体积1/5‑1/10的无菌水重新悬浮，加入混合发酵液5％‑15％(W/V)的菌体保护剂，在磁力搅拌器上进行吸附30min‑40min，或手动搅匀，静置10‑15min；(4)复合营养素与添加剂的加入：在步骤(3)收集并固定后得到的菌液中添加复合营养素与添加剂，定容至离心前的混合发酵液体积；(5)灌装：将步骤(4)所得含菌体、营养素、菌体保护剂与添加剂的液态复合生物菌肥加入经紫外消毒的塑料瓶中，贴产品标签，即得所述液态复合生物肥料。