一种多层有序的丝素蛋白组织工程支架及其制备方法

摘要

本发明涉及一种多层有序的丝素蛋白组织工程支架及其制备方法，包括：（1）以蚕茧为原料，制备质量百分比为30~40%的再生丝素蛋白水溶液；（2）采用静电纺丝工艺，以高速旋转的辊筒为收集装置制备有序排列的丝素蛋白纤维毡；（3）通过改变包覆在滚筒上铝箔的接收方向，制得不同层数、厚度和复合角度的取向纤维毡，并对其进行后处理，提高其力学性能。该方法制备的组织工程支架，结构致密、均匀，面积大小可控，具有优异的力学性能、尺寸稳定性，其表面取向形貌能引导细胞生长的形态和方向，促进细胞的黏附和增殖，其应用于生物医学领域,包括尿道、神经、肌肉、血管、肌腱和韧带的修复和再生。

主权项

一种多层有序的丝素蛋白组织工程支架的制备方法，其特征是包括以下步骤：(1)以蚕茧为原料，经脱胶、溶解、透析和浓缩后，制备质量百分比为30～40％的再生丝素蛋白水溶液；所述再生丝素蛋白水溶液的制备步骤如下：将蚕茧用质量百分比为0.5％的碳酸钠水溶液脱胶后，溶解于摩尔浓度为9.0mol/L的溴化锂水溶液中，得到再生丝素蛋白‑溴化锂水溶液；将此溶液离心、过滤、透析和浓缩，得到质量百分比为30～40％的再生丝素蛋白水溶液；(2)以步骤(1)制备再生丝素蛋白溶液为纺丝液，采用静电纺丝技术将其喷涂在高速旋转的辊筒上，辊筒表面旋转线速度为600～1000m/min，辊筒表面包覆有铝箔；喷丝头与高速旋转辊筒间接收距离为10cm，纺丝电压为20kV，制得取向纳米纤维毡；(3)待第一层纤维毡厚度达到至少12μm后，马上揭下铝箔并旋转30°～90°，重新固定在辊筒上继续纺制第二层纤维毡，两层纤维毡的间隔时间不超过6min；如此类推重复前述步骤，制得总厚度为90～160μm的再生丝素蛋白纤维毡；(4)以乙醇‑水混合溶液作为后处理剂，对步骤(3)制备的再生丝素蛋白纤维毡进行后处理，取出晾干，即得到多层有序的丝素蛋白组织工程支架；所述的两层纤维毡的间隔时间是指改变铝箔方向并重新固定铝箔的时间，控制间隔时间的目的是减少纤维毡中溶剂的挥发，增强层与层之间的粘附力；所述的后处理是指将所述的再生丝素蛋白纤维毡在所述后处理剂中定长浸泡30min；所述的多层有序的再生丝素蛋白组织工程支架是多层有序取向的丝素蛋白纤维毡，由多层取向方向成一定角度的单层再生丝素蛋白纤维毡构成；所述的单层再生丝素蛋白纤维毡由再生丝素蛋白纤维同向排列而成；所述的多层有序的再生丝素蛋白组织工程支架相邻层之间由于接触时溶剂未完全挥发而粘附紧密，层与层间的牵制作用强；所述的多层有序的再生丝素蛋白组织工程支架结构致密且均匀；所述的一定角度为30°～90°之间的任意角度，所述的多层是指至少为2层。