一种利用具有特异识别功能色谱介质快速分离纯化神经节苷脂的工业化生产工艺

摘要

本发明提供一种利用具有特异识别功能色谱介质快速分离纯化神经节苷脂的工业化生产工艺，该工艺包括静态吸附、洗脱和浓缩干燥三步骤。静态吸附：动物脑组织加提取液，匀浆，离心，分层；分层后的上清液直接加入具有特异识别功能的色谱介质，搅拌吸附1-2小时，使具有特异识别功能的色谱介质与提取液进行充分的搅拌与混合；洗脱：将吸附了神经节苷脂的具有特异识别功能的色谱介质，直接加入到洗脱液中搅拌洗脱1-2小时；浓缩干燥：将洗脱液浓缩，并在-70°-20°的环境下冷冻干燥，可获得神经节苷脂产品。该发明采用静态吸附与洗脱的方法，使色谱介质与提取液进行充分的搅拌与混合，尽量减少了提取过程中神经节苷脂的丢失，与目前沿用的大孔树脂层析法相比可提高产率15-20％；缩短了分离纯化时间10-38倍，该法操作简单，有利于工业化生产。

主权项

一种利用具有特异识别功能色谱介质快速分离纯化神经节苷脂的工业化生产工艺，其特征在于：该工艺包括静态吸附、洗脱和浓缩干燥三步骤： 1)静态吸附：动物脑组织加提取液，匀浆，离心，分层；分层后的上清液直接加入具有特异识别功能的色谱介质，搅拌吸附1‑2小时，使具有特异识别功能的色谱介质与提取液进行充分的搅拌与混合，尽量减少提取过程中神经节苷脂的丢失； 2)洗脱：将吸附了神经节苷脂的具有特异识别功能的色谱介质，直接加入到洗脱液中搅拌洗脱1‑2小时； 3)浓缩干燥：将洗脱液浓缩，并在‑70°—‑20°的环境下冷冻干燥，可获得神经节苷脂产品； 上述洗脱液为氯仿和甲醇按3‑5∶1‑3的比例混合而成； 上述具有特异识别功能的色谱介质，其研制包括对麦饭石的预处理和特异识别功能的色谱介质的制备： 1)对麦饭石预处理：将粒度为20‑60目的麦饭石加入到0.5‑2.5mol/L盐酸中，麦饭石与盐酸溶液的质量比为1∶10‑15；浸泡时间为20‑38小时；浸泡完毕后用蒸馏水将麦饭石洗至中性，烘干备用； 2)特异识别功能的色谱介质的制备：先将乙醇度为90％‑60％的壳聚糖加入到浓度为1‑8％的醋酸溶液中，配制成中浓度为0.1％‑0.5％的壳聚糖溶液60‑180ml；再将已经处理好的20‑80g麦饭石加入到壳聚糖溶液中调成糊状，最后将此糊状混合物加热干燥，研细过90‑120目筛，即得到具有特异识别功能的色谱介质。