一种生产瑞替普酶的发酵培养基及其制备方法

摘要

本发明涉及一种用于生产瑞替普酶的发酵培养基及其制备方法，所述发酵培养基主要由KH₂PO₄、K₂HPO₄ ·2H₂O、(NH₄)₂SO₄、FeSO₄·7H₂O、CaCl₂·2H₂O、CoCl₂·6H₂O、CuSO₄·5H₂O、MnSO₄·H₂O、Na₂MoO₄·2H₂O、20%酪蛋白、MgSO₄、50mg/ml卡那霉素、葡萄糖、柠檬酸、消泡剂、酵母提取物和H₂O组成，按照各组培养液组成要求在蒸馏水中溶解并用氢氧化钠调节pH值，最后在发酵罐中灭菌即得。本发明采用的发酵培养基减轻了现有工艺发酵中对菌体生长和蛋白表达的抑制作用，使瑞替普酶大肠杆菌表达水平高，稳定性好，提高了瑞替普酶的产率。

主权项

一种用于生产瑞替普酶的发酵培养基，其特征在于，由KH₂PO₄、K₂HPO₄ ·2H₂O、(NH4)₂SO₄、FeSO₄·7H₂O、CaCl₂·2H₂O、CoCl₂·6H₂O、CuSO₄·5H₂O、MnSO₄·H₂O、Na₂MoO₄·2H₂O、20%酪蛋白、MgSO₄、卡那霉素、葡萄糖、柠檬酸、消泡剂、酵母提取物和H₂O组成，其中主要组成为：A液：每升H₂O中含KH₂PO₄  25‑40g、K₂HPO₄ ·2H₂O 57.5‑80g、(NH4)₂SO₄ 17.5‑25.8g、FeSO₄·7H₂O  0.008‑0.015g；B液：每升H₂O中含CaCl₂·2H₂O 0.8‑1.6g、CoCl₂·6H₂O  1.60‑2.93g、CuSO₄·5H₂O 1.5‑2.5g、FeSO₄·7H₂O  1.80‑2.87g、MnSO₄·H₂O 1.0‑1.93g、Na₂MoO₄·2H₂O 1.60‑2.67g；C液：每升H₂O中含20%酪蛋白25.0‑42.0ml、1M MgSO₄ 16.0‑37.0ml、50mg/ml卡那霉素10.0‑23.5ml、70%葡萄糖772.5‑867.5ml、40%(NH₄)₂SO₄ 80‑120ml、5%柠檬酸1.5‑5.0ml。