一种采用PCR方法扩增粪便细粒棘球绦虫DNA的方法

摘要

本发明公开了一种采用PCR方法扩增粪便细粒棘球绦虫DNA的方法，具体为，(1)PCR反应总体积为25μl，包括0.1μg BSA、pH9.2 104μmol/L Tri s-HCl、2.5×10⁴μmol/L KCl、1.5×103μmol/LMgCl2、200μmol/L dNTP、0.4μmol/L引物、2.5UTaq酶及2.5μl DNA样品；上游引物Eglf：5′-CATTAATGTATTTTGTAAAGT-TG-3，下游引物Eglr：5′-CACATCATCTTA-CAATAACACC-3′；目的片段大小为255bp；(2)热循环参数：95℃预变性5min；95℃30s；53.5℃30s；72℃45s；共40次循环；72℃后延伸10min；(3)1.5％琼脂糖电泳检测PCR产物。本发明所带来的有益效果是：采用PCR方法检测前需对粪便进行加热处理，消除了虫卵的感染力。PCR方法不仅可以区分形态上相似的虫卵，还可能对虫卵数做出预测。

主权项

一种采用PCR方法扩增粪便细粒棘球绦虫DNA的方法，其特征在于，具体为，(1)PCR反应总体积为25μl，包括0.1μg BSA、pH9.2 104μmol/L Tris‑HCl、2.5×10⁴μmol/L KCl、1.5×103μmol/LMgCl2、200μmol/L dNTP、0.4μmol/L引物、2.5UTaq酶及2.5μl DNA样品；上游引物Eglf：5′‑CATTAATGTATTTTGTAAAGT‑TG‑3，下游引物Eglr：5′‑CACATCATCTTA‑CAATAACACC‑3′；目的片段大小为255bp；(2)热循环参数：95℃预变性5min；95℃30s；53.5℃30s；72℃45s；共40次循环；72℃后延伸10min；(3)1.5％琼脂糖电泳检测PCR产物。