发明名称 一种高盆樱桃(原变种)茎段组织培养获得再生植株的方法
摘要 本发明公开了一种高盆樱桃(原变种)茎段组织培养获得再生植株的方法。该方法包括如下步骤:(1)外植体消毒;(2)诱导培养;(3)增殖培养;(4)生根壮苗培养;(5)炼苗移栽。本发明采用高盆樱桃(原变种)茎段为外植体进行组织培养,能够通过选择优良母本进行取材,快速获得大量高度一致同时具有优良表型的群体;而且由于组织培养不受季节限制,并且能保持通过有性繁殖不能保持的优良性状,能够满足园林绿化对其需求量的要求,为提高户外园林景观的周年观赏价值具有极其重要的意义。
申请公布号 CN104145814A 申请公布日期 2014.11.19
申请号 CN201410357605.6 申请日期 2014.07.24
申请人 四川农业大学 发明人 张帆;万雪琴;叶露;钟宇;张双;赵景龙;蒋时姣;朱逸涛
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 代理人 裴娜
主权项 一种高盆樱桃(原变种)茎段组织培养获得再生植株的方法,其特征是,其步骤如下:(1)外植体消毒在天气晴朗的下午,取林间半木质化高盆樱桃(原变种)新稍,装入塑料袋中,带回室内,稍作修剪,用2.0g/l洗衣粉溶液浸泡30min,将表面灰尘用毛刷轻轻刷去,并剪成独立的带顶芽的小枝条,长度5cm;将小枝条置于烧杯中,流水冲洗3h;吸干外植体表面的水分,再用0.2%W/V的多菌灵溶液浸泡30min,用蒸馏水清洗2次,放入无菌培养室进行无菌消毒;在超净工作台下用体积百分浓度为75%的酒精消毒10‑20s后,再用0.1%W/V的升汞浸泡4‑6min,然后在无菌条件下用无菌水清洗4‑6次,用无菌纱布吸干备用;(2)诱导培养从(1)中处理后的小枝条上截取2.5cm的茎段,每个茎段带一个芽点,接入诱导培养基中,先置于黑暗培养箱中培养72‑120h,再置于光照培养箱中培养,12d~15d即有芽开始膨大萌动,40d~45d即长出丛生芽;(3)增殖培养将诱导产生的丛生芽分株,每株约含3个芽,接种到增殖培养基上,置于光照培养箱内培养,45d后产生大量丛生芽,继续进行分株增殖培养;(4)生根壮苗培养在(3)中培养后的丛生芽中,剪取3‑5cm带顶芽的材料,接种到生根培养基,置于光照培养箱中培养25d~30d后,获得生长健壮且具有效根的幼苗;(5)炼苗移栽将已经生根的幼苗置于自然光下闭瓶培养10d,然后解开封口膜绳子炼苗5d,接着打开封口膜炼苗7d,再将幼苗小心取出栽种,栽种基质是泥炭和红壤,其体积比为1:1,28d~30d后长出新的嫩芽,幼苗成活。
地址 611130 四川省成都市温江区惠民路211号四川农业大学