| 发明名称 | 一种纳豆激酶高效表达的方法及其用途 | ||
| 摘要 | 本发明涉及一种纳豆激酶高效表达的方法及其用途，其特征在于：运用基因工程技术构建高效表达质粒，优化工程菌发酵条件实现纳豆激酶的低成本、高活性、高产量生产。用PCR的方法从分泌纳豆激酶的枯草芽孢杆菌基因组DNA中扩增得到全长为1056bp的前导肽+成熟肽纳豆激酶原基因，构建重组表达质粒pBE2S-Pro-NK，转化重组质粒到枯草芽孢杆菌WB600菌株后取培养液，用硫酸铵分级沉淀法纯化分泌到培养液中的纳豆激酶，经聚丙烯酰铵凝胶电泳SDS-PAGE成单一条带，经纤维平板法检测出现透明圈，得到有活性的纯度较高的纳豆激酶。这些方法可以用于工业化生产用于生产纳豆激酶胶囊、纳豆激酶肠溶片和注射针剂。 | ||
| 申请公布号 | CN103923896A | 申请公布日期 | 2014.07.16 |
| 申请号 | CN201410068833.1 | 申请日期 | 2014.02.28 |
| 申请人 | 武汉万密斋养生堂科技发展有限公司 | 发明人 | 邱东茹;阮晶;洪峰 |
| 分类号 | C12N9/56(2006.01)I;C12N15/75(2006.01)I;C12R1/125(2006.01)N | 主分类号 | C12N9/56(2006.01)I |
| 代理机构 | 代理人 | ||
| 主权项 | 一种纳豆激酶高效表达的方法，其特征在于：纳豆激酶高效表达的方法是，运用基因工程技术构建高效表达质粒，优化工程菌发酵条件实现纳豆激酶的低成本、高活性、高产量生产，用PCR的方法从分泌纳豆激酶的枯草芽孢杆菌基因组DNA中扩增得到全长为1056bp的前导肽+成熟肽纳豆激酶原基因，构建重组表达质粒pBE2S‑Pro‑NK，转化重组质粒到枯草芽孢杆菌WB600菌株后取培养液，用硫酸铵分级沉淀法纯化分泌到培养液中的纳豆激酶，经聚丙烯酰铵凝胶电泳SDS‑PAGE成单一条带，经纤维平板法检测出现透明圈，得到有活性的纯度较高的纳豆激酶。 | ||
| 地址 | 430000 湖北省武汉市光谷生物城生物医药园B8栋 | ||