HLA-B*27等位基因检测方法及其试剂盒

摘要

本发明涉及用于检测人类白细胞HLA-B*27抗原基因的方法，包括提供待测样品、核酸扩增体系和荧光检测体系混合物；通过扩增反应循环扩增靶多核苷酸；使荧光发生基团与被扩增的靶多核苷酸序列间接结合；测定荧光发生基团产生的荧光量，确定靶多核苷酸的存在及其相对量；所述核酸扩增体系由耐热DNA聚合酶、2’-脱氧核苷三磷酸、能够与靶多核苷酸的第一、二条链结合的引物组成。本发明还公开了与其配套使用的试剂盒。本发明方法与试剂盒应用于人HLA-B*27等位基因检测，可实现HLA-B*27等位基因的杂合型与纯合型的定量区分，对于HLA-B*27等位基因强关联性疾病的早期预警更具优势。

主权项

一种HLA‑B*27等位基因检测方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）提供包括待测样品、核酸扩增体系和荧光检测体系的混合物；（2）通过扩增反应循环扩增待测样品中的靶多核苷酸；（3）使所述荧光检测体系中的荧光发生基团与被扩增的靶多核苷酸序列间接结合；（4）测定荧光发生基团所产生的荧光量，从而确定靶多核苷酸的存在及其相对量；所述核酸扩增体系由如下组分组成：耐热DNA聚合酶、2’‑脱氧核苷三磷酸、能够与靶多核苷酸的第一条链结合的正向引物a和能够与靶多核苷酸的第二条链结合的反向引物a，能够与靶多核苷酸的第一条链结合的正向引物b和能够与靶多核苷酸的第二条链结合的反向引物b；所述荧光检测体系是能够与靶多核苷酸结合并且两端分别结合有荧光发生基团和荧光淬灭基团的两条寡核苷酸探针。