发明名称 一种肽-晚期糖基化终末产物的检测方法
摘要 本发明公开了一种肽-晚期糖基化终末产物的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)液体样品中二羰基化合物的消除;(2)通过固相萃取技术对样品进行除杂和肽-晚期糖基化终末产物的富集;(3)利用高分辨质谱对富集后的肽-晚期糖基化终末产物定性;(4)利用肽酶对富集后的肽-晚期糖基化终末产物进行酶解,过膜除去肽酶,得到游离态的晚期糖基化终末产物;(5)通过质谱分析对游离态的晚期糖基化终末产物进行定量分析。本发明方法能够高通量检测肽-晚期糖基化终末产物,减少了肽-晚期糖基化终末产物定量检测的复杂性,且具有较好的检出限,目标物的浓度和其信号的峰面积具有良好的线性关系,具有很好的定量效果。
申请公布号 CN103884787A 申请公布日期 2014.06.25
申请号 CN201410060941.4 申请日期 2014.02.21
申请人 华南理工大学;中山大学附属第三医院 发明人 李琳;梁志理;李冰;苏健裕;徐振波;卞华伟;李玉婷
分类号 G01N30/02(2006.01)I;G01N30/08(2006.01)I 主分类号 G01N30/02(2006.01)I
代理机构 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 代理人 宫爱鹏
主权项 一种肽‑晚期糖基化终末产物的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)液体样品中二羰基化合物的消除;(2)通过固相萃取技术对样品进行除杂和肽‐晚期糖基化终末产物的富集,具体步骤:选取官能化聚苯乙烯/二乙烯苯萃取柱,分别使用甲醇和水活化萃取柱,上样,用水淋洗去除杂质,用纯甲醇将肽‐晚期糖基化终末产物洗脱出来;氮吹复溶,最后过膜;(3)利用高分辨质谱对富集后的肽‐晚期糖基化终末产物定性;(4)利用肽酶对富集后的肽‐晚期糖基化终末产物进行酶解,过膜除去肽酶,得到游离态的晚期糖基化终末产物;(5)通过质谱分析对游离态的晚期糖基化终末产物进行定量分析。
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