白芨种茎的生产方法

摘要

本发明公开了一种白芨种茎的生产方法，包括如下步骤：1）外植体的处理及接种；2）原球茎的获得与增殖；3）原球茎分化成苗；4）试管球茎的获得；5）一级种茎的获得；6）二级种茎的获得。本发明利用白芨成熟种子进行无菌播种培养，获得大量的试管种茎，再通过一级、二级种茎的繁殖，从而获得可栽种于大田的较大的生产用种茎，此方法克服了组培苗直接炼苗成活率低的问题，解决了白芨人工规模化种植的种源问题，为白芨的持续发展及开发利用奠定了基础。

主权项

一种白芨种茎的生产方法，其特征在于：包括如下步骤：1）外植体的处理及接种：在9‑10月采集白芨蒴果，用水冲洗干净表面灰尘，自然晾干后，在超净工作台上用质量百分比浓度为75％的酒精浸泡消毒30 s，再用0.1%升汞液浸泡消毒8 min，然后用无菌水清洗5次后，再用无菌的滤纸将白芨蒴果表面的水分吸干，将白芨蒴果内的种子取出后，均匀的撒播到种子萌发培养基的表面，在培养室中培养，培养温度为25±2℃，光照强度为1500‑2000Lx，光照时间为12h/d；所述的萌发培养基的主体为1/2MS培养基，其中NAA为0.5mg/L，6‑BA为1.0 mg/L，白糖的质量百分比为3%，琼脂粉的质量百分比为0.7%，pH为5.8；2）原球茎的获得与增殖：种子培养10天后，形成黄色原球茎，在原球茎未分化出叶片时转接到增殖培养基中，放置于温度为25±2℃的培养室培养，光照强度1500‑2000Lx，光照时间12h/d，培养25天后，形成丛生形原球茎；所述的增殖培养基的主体为MS培养基，其中NAA为0.2mg/L，6‑BA为0.5 mg/L，白糖的质量百分比为3%，琼脂粉的质量百分比为0.7%，pH为5.8；3）原球茎分化成苗：将丛生形原球茎转接于分化培养基中，置25±2℃的培养室、光照强度1500‑2000Lx、光照时间12h/d条件培养,至培养获得2‑3片叶的植株；所述的分化培养基的主体为MS培养基，其中NAA为0.3mg/L，白糖的质量百分比为3%，琼脂粉的质量百分比为0.7%，pH为5.8；4）试管球茎的获得：将步骤3）获得的植株转接于生根培养基中，在温度为25±2℃的培养室培养，光照强度1500‑2000Lx，光照时间12h/d，培养45‑60天后，获得试管球茎；所述的生根培养基的主体为MS培养基，其中NAA为0.5mg/L，6‑BA为0.1mg/L，白糖的质量百分比为3%，琼脂粉的质量百分比为0.7%，pH为5.8；5）一级种茎的获得：将形成有试管球茎的培养瓶放在室温下放置3天，然后揭开封口膜炼苗2天，用镊子将瓶中的试管球茎夹出，在自来水下冲洗掉培养基，并清理干净枯叶及根，栽种于准备好的蛭石和细树皮的混合基质中，蛭石和细树皮的体积比为4:1，细树皮粒径小于1cm，浇淋透1000倍多菌灵液，然后按照常规管理，待发新芽时开始每半月喷施一次营养液；待生长期结束，叶片枯黄脱落，采收地下部的白芨球茎，即获得一级种球茎；6）二级种茎：当气温回升时，将获得的一级种茎种植在蛭石、腐殖土和细树皮混合的基质中，蛭石、腐殖土和细树皮的体积比为3:1:1，细树皮粒径小于1cm，淋透1000倍多菌灵液，按照常规管理；待种茎发出新芽时开始每半月喷施一次营养液，待叶片枯黄脱落时，采收地下部白芨球茎，获得作为栽培生产用种茎的二级种茎。