一种提高猪蓝耳病病毒靶细胞感染滴度的方法及其应用

摘要

本发明公开了一种提高猪蓝耳病病毒靶细胞感染滴度的方法及其应用，属于动物疫病预防控制领域。通过构建能够表达猪蓝耳病病毒受体硫酸乙酰肝素、唾液酸粘附素、波形蛋白、CD163、CD151和非肌肉肌球蛋白重链ⅡA受体中的单个或多个的Marc145细胞或MA-104细胞，再利用该细胞接种猪蓝耳病病毒，收集病毒液，猪蓝耳病病毒感染滴度得到大幅提高；收集的病毒液可进一步用于蓝耳病疫苗生产。本发明利用能表达猪蓝耳病病毒受体细胞接种病毒，可连续收获病毒且收获病毒滴度提高2～5倍，而所制备疫苗的效力并没有降低，在不增加额外生产成本的基础上，使单位时间产能提高2～5倍。

主权项

一种提高猪蓝耳病病毒靶细胞感染滴度的方法，其特征在于包括如下步骤：用细胞生长液培养可表达猪蓝耳病病毒受体的细胞；待细胞覆盖率达到80%以上时，移除细胞生长液，接种猪蓝耳病病毒，加入细胞维持液继续培养；待病毒引起的细胞病变达到80%以上时收获病毒液，随后补入不含病毒的细胞维持液，12h后再收毒，如此反复收毒3～5次。