一种食甲醇芽孢杆菌及其烟用酸枣仁浸膏的制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种食甲醇芽孢杆菌，该菌株名为Bacillus methylotrophicus VJ4-1，保藏编号CCTCC NO：M 2012004。本发明提供利用微生物食甲醇芽孢杆菌生物转化烟用酸枣仁浸膏以及烟用酸枣仁浸膏在烟草中的应用。本发明酸枣仁经微生物菌株发酵能生产天然香料-烟用酸枣仁浸膏，方法工艺简单，原料来源广泛，生产过程环保无害，有工业化使用前景；所得天然香料浸膏能直接用于卷烟的加香，具有烟气协调、增加奶油甜香、花香、柔和舒适、改善吸味的优点，能与其它烟用香精香料混合调配使用。

主权项

一种利用食甲醇芽孢杆菌生物转化烟用酸枣仁浸膏的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将酸枣仁和水按质量比1∶20～40回流提取1～3小时后过滤，将滤液灭菌；2）斜面培养：将食甲醇芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）接种到马铃薯葡萄糖琼脂斜面培养基上，在25～35℃、pH5～10条件下，静置培养24～72小时后，其中，所述食甲醇芽孢杆菌已于2012年1月11日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：M2012004；3）制备种子培养液：用上述步骤2）中所得的斜面培养物，接种到种子培养基，在25～35℃，转速100～150rpm条件下振荡培养12～36h，连续转接1～4次后制得种子培养液；4）发酵：将种子培养液按体积比5～20%接种到上述步骤1）中的酸枣仁滤液中形成发酵液，上述发酵液的装罐量为20～40%，在pH4～10，温度25～40℃，转速100～200rpm，不避光条件下发酵7～14天；5）将步骤4）中所得的发酵液和95%乙醇按体积比1∶3～4，沉淀过夜后抽滤，将滤液减压浓缩除去溶剂，制得相对密度为1.20～1.36的烟用酸枣仁浸膏。