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一种制备D‑酪氨酸的化学‑酶法,其特征是以DL‑酪氨酸为原料,在酸性介质中采用酰化剂衍生得到DL‑N‑苯乙酰酪氨酸,以固定化酶为生物催化剂,在水介质中对映选择性催化DL‑N‑苯乙酰酪氨酸为D‑N‑苯乙酰酪氨酸、苯乙酸和L‑酪氨酸,D‑N‑苯乙酰酪氨酸酸解为苯乙酸和D‑酪氨酸,经浓缩、萃取、等电点调节、结晶、过滤、干燥得到D‑酪氨酸;包括以下步骤:1)DL‑N‑苯乙酰酪氨酸制备:在50~80℃和pH2~3条件下,以醋酸为反应介质,摩尔比为1:1~3的DL‑酪氨酸与酰化剂搅拌反应10~20h;反应完成后用盐酸调pH1~2,析出DL‑N‑苯乙酰酪氨酸固体;2)DL‑N‑苯乙酰酪氨酸酶催化水解:在20~40℃和pH8~10条件下,0.1~0.5mol/L DL‑N‑苯乙酰酪氨酸在固定化青霉素酰化酶催化下水解10~20h;固定化青霉素酰化酶与DL‑N‑苯乙酰酪氨酸的质量比为1:3~10,反应完成后,浓盐酸调pH1~2,析出苯乙酸和D‑N‑苯乙酰酪氨酸;3)D‑酪氨酸制备:D‑N‑苯乙酰酪氨酸在氮气保护下,在3~8mol/L盐酸水溶液中,温度90~115℃下酸解3~15h,酸解液浓缩至盐酸水溶液的1/5~1/10,用与浓缩液等体积的乙酸乙酯萃取苯乙酸三次,水相调pH5.6,冷冻析出D‑酪氨酸。 |