一种测定新霉素的螺旋免疫组装传感器的构建方法

摘要

一种测定新霉素的螺旋免疫组装传感器的构建方法，属于材料化学技术领域。本发明包括：水溶性螺旋聚合物的制备，半抗原修饰螺旋聚合物，抗体偶联金纳米粒子，新霉素传感器的建立。本发明提供一种水溶性螺旋聚合物聚4-异氰基苯甲酸，通过免疫识别（新霉素半抗原修饰螺旋聚合物）与金纳米粒子（偶联抗体）组装，通过组装后产生的圆二色谱（CD）信号对新霉素进行检测。

主权项

一种测定新霉素的螺旋免疫组装传感器的构建方法，其特征在于包括：水溶性螺旋聚合物的制备，半抗原修饰螺旋聚合物，金纳米粒子偶联抗体，新霉素传感器的建立；具体步骤为：（1）水溶性螺旋聚合物聚4‑异氰基苯甲酸的制备a、4‑氨基苯甲酸甲酯的制备b、4‑甲酸氨苯甲酸甲酯的制备c、4‑异氰基苯甲酸甲酯的制备d、4‑异氰基苯甲酸钠的制备e、聚4‑异氰基苯甲酸钠的制备f、聚4‑异氰基苯甲酸的制备（2）半抗原修饰螺旋聚合物1μL 碳化二亚胺EDC和2.4mg N‑羟基硫代琥珀酰亚胺sulfo‑NHS加入到0.5mL 100 mg/mL的步骤（1）合成的聚4‑异氰基苯甲酸水溶液中，反应10‑15 min活化，活化后的聚4‑异氰基苯甲酸加入1mg新霉素，室温反应4h，透析除去未反应的药物小分子；得聚4‑异氰基苯甲酸‑新霉素复合物，即为半抗原修饰螺旋聚合物；（3）金纳米粒子偶联抗体10mL 20nM 8nm金纳米粒子溶液，加入200μL 100μg/mL新霉素抗体，0.1M K2CO3调节pH值为8.0，反应1h；得金纳米粒子偶联抗体；（4）新霉素传感器的建立1mL 20nM步骤（3）合成的金纳米粒子偶联抗体加10μL 100mg/mL步骤（2）合成的半抗原修饰螺旋聚合物，加入0.1‑100ng/mL 新霉素标准品，反应1h后，取组装好的体系100μL于比色皿中，用水做空白对照，圆二色谱仪扫描波长200‑800nm CD值。