限制性核酸内切酶增强的多态序列检测

摘要

本发明提供一种检测混合DNA群体中的特异性多态等位基因的改良方法。所述方法包含使通过PCR呈指数扩增的指定多态等位基因的相对百分比富集化。本发明还提供选择性地富集目标核酸(例如，母体样品中的胎儿核酸)的方法。在检测母体样品中的胎儿核酸的情形中，引入可辨别多态位点的等位基因的限制性内切酶。优选地，母源等位基因被消化且包含父源等位基因的核酸被相对地富集。

主权项

一种检测样品中在多个多态基因座处是否存在多个目标等位基因的方法，其中所述样品含有母亲核酸和胎儿核酸，所述方法包含：a)用单切断试剂切断在所述多个多态基因座处包含多个非目标等位基因的核酸，其中所述单切断试剂识别所述非目标等位基因的所述多态基因座而不识别所述目标等位基因的所述多态基因座，其中所述切断试剂是热不稳定性限制性核酸内切酶；b)提升温度以使所述核酸内切酶失活；c)步骤b)后，使未切断核酸扩增而不使切断核酸扩增；及d)在序列标识符处分析步骤c)的扩增产物以确定是否存在多个目标等位基因，其中，(i)所述序列标识符在所述目标等位基因的所述多态基因座处；及(ii)所述目标等位基因源自父亲且所述非目标等位基因源自母亲。