一种人原代肿瘤细胞分离与培养试剂盒

摘要

本发明提供一种人原代肿瘤细胞分离与培养试剂盒，由包装盒、6孔细胞培养板、清洗液、胰酶消化液、胶原酶－透明质酸酶消化液、细胞分离液、肿瘤选择性培养液、使用说明书组成。其中清洗液是含青霉素400U/mL、链霉素400ug/mL的无菌RPMI1640细胞培养液。本发明克服当前原代肿瘤细胞培养过程复杂、所得肿瘤纯度不高、易受细胞污染的问题。本发明设计合理，在进行体外原代肿瘤细胞的分离与培养过程中受细菌污染的机会少，仅需要少量离心管等其它常用耗材，因此使用简单方便，培养的肿瘤细胞纯度更高、效果好。

主权项

一种人原代肿瘤细胞分离与培养试剂盒，其特征在于，由包装盒(1)、6孔细胞培养板（2）、清洗液（3）、胰酶消化液(4)、胶原酶－透明质酸酶消化液(5)、细胞分离液(6)、肿瘤选择性培养液(7)、使用说明书(8)组成；其中所述清洗液（3）是含青霉素400U/mL、链霉素400ug/mL的无菌RPMI 1640细胞培养液；胰酶消化液（4）是用无菌超纯水配制含0.1%胰蛋白酶、10g/L聚乙烯吡咯烷酮的胰酶消化液；胶原酶－透明质酸酶消化液（5）是用RPMI 1640细胞培养液配制，胶原酶终浓度为2g/L，透明质酸酶终浓度为2g/L；细胞分离液（6）是将纯percoll分离液与10倍PBS缓冲液以体积比为9:1比例混合后再与1倍PBS液以体积比为7:3比例混匀后制备密度为1.09的细胞分离液；肿瘤选择性培养液（7）是在RPMI 1640细胞培养液中添加10%新生胎牛血清、青霉素100U/mL、链霉素100ug/mL、胰岛素5ug/mL、氢化可的松2ug/mL、人重组表皮生长因子5ng/mL；所述的肿瘤细胞为肝癌细胞。