基因载体系统及其制备方法

摘要

本发明提供了一种基因载体系统，包括：pH值敏感材料，所述pH值敏感材料为超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物，或者为聚乙二醇、超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物，或者为低聚磺胺，或者为聚乙二醇与低聚磺胺的缩合物；由基因载体和基因物质组成的复合物，所述基因载体与所述基因物质的质量比为0.5∶1～50∶1；所述pH值敏感材料复合在所述复合物的表面，所述pH值敏感材料与所述复合物中的基因载体的质量比为1∶1～80∶1。本发明提供的基因载体系统能够有效保护基因载体和基因物质在正常细胞内的运输，能够促进基因载体和基因物质与肿瘤细胞的结合，从而提高转染效率。

主权项

一种基因载体系统，由以下方法制备：将基因载体水溶液与基因物质水溶液混合后孵育，得到复合物，所述基因载体与所述基因物质的质量比为2.5:1，所述基因载体为聚乙烯亚胺、树枝状聚酰胺或聚赖氨酸；向所述复合物中加入pH值敏感材料的水溶液，得到基因载体系统，所述pH值敏感材料与所述基因载体的质量比为10:2.5～20:2.5；所述pH值敏感材料复合在所述复合物的表面；所述pH值敏感材料为超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物，或者为聚乙二醇、超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物，其中，所述超支化聚乙烯亚胺的分子量为600～10000，所述聚赖氨酸的分子量为1000～25000，所述聚谷氨酸的分子量为1000～25000，所述聚乙二醇的分子量为1000～10000；所述超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物按照以下方法制备：将超支化聚乙烯亚胺和ε‑苄氧羰基‑L‑赖氨酸N‑羧酸酐在氯仿中反应，得到第一中间产物；向所述第一中间产物中加入γ‑苄基‑L‑谷氨酸‑N‑羧酸酐，反应后得到苄基保护的超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物；将所述苄基保护的超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物脱保护，得到超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物；所述聚乙二醇、超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物按照以下方法制备：将超支化聚乙烯亚胺和ε‑苄氧羰基‑L‑赖氨酸N‑羧酸酐在氯仿中反应，得到第一中间产物；向所述第一中间产物中加入γ‑苄基‑L‑谷氨酸‑N‑羧酸酐，反应后得到苄基保护的超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物；将所述苄基保护的超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物脱保护，得到超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物；带有羧基的聚乙二醇、N‑羟基琥珀酰亚胺和1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳 二亚胺发生反应，得到第二中间产物；向所述第二中间产物中加入所述超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物，反应后得到聚乙二醇、超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物;当所述pH值敏感材料为超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物时，所述超支化聚乙烯亚胺的分子量为600，聚赖氨酸的分子量为4000，聚谷氨酸的分子量为6000，超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的摩尔比为1：30：45；或者所述超支化聚乙烯亚胺的分子量为600，聚赖氨酸的分子量为8000，聚谷氨酸的分子量为12000，超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的摩尔比为1：65：98；或者所述超支化聚乙烯亚胺的分子量为1800，聚赖氨酸的分子量为4000，聚谷氨酸的分子量为6000，超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的摩尔比为1：30：45；或者所述超支化聚乙烯亚胺的分子量为1800，聚赖氨酸的分子量为8000，聚谷氨酸的分子量为12000，超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的摩尔比为1：65：98；当所述pH值敏感材料为聚乙二醇、超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物时，所述聚乙二醇的分子量为1000，超支化聚乙烯亚胺的分子量为600，聚赖氨酸的分子量为4000，聚谷氨酸的分子量为6000，超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的摩尔比为1：30：45，聚乙二醇与超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物的摩尔比为1:1；或者所述聚乙二醇的分子量为1000，超支化聚乙烯亚胺的分子量为600，聚赖氨酸的分子量为8000，聚谷氨酸的分子量为12000，超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的摩尔比为1：65：98，聚乙二醇与超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物的摩尔比为1:1；或者所述聚乙二醇的分子量为4000，超支化聚乙烯亚胺的分子量为1800，聚赖氨酸的分子量为4000，聚谷氨酸的分子量为6000，超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的摩尔比为1：30：45，聚乙二醇与超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物的摩尔比为1:1；或者所述聚乙二醇的分子量为4000，超支化聚乙烯亚胺的分子量为1800，聚赖氨酸的分子量为8000，聚谷氨酸的分子量为12000，超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的摩尔比为1：65：98，聚乙二醇与超支化聚乙烯亚胺、聚赖氨酸和聚谷氨酸的共聚物的摩尔比为1:1。