制备重组人源神经生长因子蛋白质的方法及复性液

摘要

本发明涉及制备重组人源神经生长因子(rhNGF)蛋白质的方法及复性液，所述方法包括通过工程大肠杆菌表达rhNGF蛋白质，破碎表达rhNGF蛋白质的工程大肠杆菌菌体，离心收集rhNGF蛋白质包涵体，利用变性体系变性溶解包涵体以形成包涵体溶解后溶液，复性液以大于1080ml/min的流速加入到包涵体溶解后溶液中进行复性，纯化rhNGF蛋白质。所述复性液包含45～55mMTris-HCl，0～10mMβ-巯基乙醇，0～1mM二价铜盐，0.95～1.05mM EDTA，pH8.5～10.0。本发明的方法通过复性液瞬间加入稀释复性提高了复性率，降低了生产成本，且操作简单。

主权项

一种制备重组人源神经生长因子蛋白质的方法，该方法包括步骤①通过工程大肠杆菌表达重组人源神经生长因子蛋白质，②破碎表达所述重组人源神经生长因子蛋白质的工程大肠杆菌菌体，③离心收集所述重组人源神经生长因子蛋白质的包涵体，④利用变性体系变性溶解所述包涵体以形成包涵体溶解后溶液，⑤将复性液加入到所述包涵体溶解后溶液中进行复性，⑥纯化所述重组人源神经生长因子蛋白质，其中所述复性液以大于1080ml/min的流速加入到所述包涵体溶解后溶液中,所述复性液由45～55mM Tris‑HCl，0～10mMβ‑巯基乙醇，0～1mM二价铜盐，0.95～1.05mM EDTA组成，pH8.5～10.0。