脑膜炎奈瑟菌全菌抗原包被酶标反应板的制法及ELISA检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种脑膜炎奈瑟菌全菌抗原包被酶标反应板的制法及ELISA检测试剂盒，包被酶标反应板是将A型和C型脑膜炎奈瑟菌等量混合后全菌抗原包被包被酶标反应板，采用间接ELISA法方便快速地检出血清中特异性脑膜炎奈瑟菌IgM；试剂盒由脑膜炎奈瑟菌全菌抗原包被酶标反应板、标本稀释液、洗涤液、显色液、终止液构成。本发明建立了敏感快速的ELISA抗体捕获血清中脑膜炎奈瑟菌特异性IgM抗体的方法，具有高特异性，高稳定性，主要供实验室研究和临床诊断使用。

主权项

脑膜炎奈瑟菌全菌抗原包被酶标反应板的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)、在96孔酶标板的每孔内加入0.1M NaHCO3稀释的5％戊二醛200μl，于37℃温箱中放置60‑70分钟，然后用去离子水洗涤96孔酶标板3‑5次，甩干，备用；(2)、将A型脑膜炎奈瑟菌和C型脑膜炎奈瑟菌等体积混合后，用包被液按1∶1000的体积比稀释后，包被处理后的96孔酶标板，每孔95‑105μl；然后于37℃温箱中烘干20‑25小时；包被液为0.05mol/L、pH9.6的碳酸钠‑碳酸氢钠缓冲液，由Na2CO3 1.5g，NaHCO3 2.9g，Na2N3 0.2g，加双蒸水至1000ml，调至pH9.6制得；(3)、取过夜烘干的抗原包被96孔酶标板用200μl用PBS稀释的10％小牛血清的填满，然后于35‑38℃下封闭1‑2小时，得到抗原包被酶标反应板。